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一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法 

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申请/专利权人:中国农业科学院兰州兽医研究所

摘要:本发明公开了一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法。所述的方法包括以下步骤:1根据G‑TPP分子式,合成高纯度TRAP1抑制剂G‑TPP;2将步骤1中所述的G‑TPP在DMSO中稀释成10mmolml的储存液;3用含10vol%血清的培养基培养人源化细胞,待细胞铺满90%以上,添加步骤2中的G‑TPP储存液,使其终浓度为10μmolml,处理2‑6h。该方法利用TRAP1特异抑制剂G‑TPP处理人源细胞系,其能干扰线粒体蛋白的正确折叠,能快速诱导UPRMT,但不会激活UPRER,这为进一步研究UPRMT的分子机制和UPRMT在人类疾病和病毒感染中的作用提供了技术手段。

主权项:1.一种线粒体未折叠蛋白反应mitochondrialunfoldedproteinresponse,UPRMT体系的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:1根据G-TPP分子式,合成高纯度TRAP1抑制剂G-TPP;2将步骤1中所述的G-TPP在DMSO中稀释成10mmolml的储存液;3用含10vol%血清的培养基培养人源化细胞SMMC7721,待细胞铺满90%以上,添加步骤2中的G-TPP储存液,使其终浓度为10μmolml,处理2-6h;4对UPRMT相关转录分子和分子伴侣的表达水平进行检测,所述的检测是指采用qRT-PCR的方法对UPRMT相关转录分子和分子伴侣的表达水平进行检测,UPRMT相关转录分子和分子伴侣包括ATF4,DDIT3,HSP60和HSPE1。

全文数据:

权利要求:

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