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申请/专利权人：深圳盛源生物技术有限公司

摘要：本发明一种检测血浆中抑制素A含量的试剂盒由如下成分组成：包被有第一位点抑制素A抗体的磁微粒混悬液、校准品、酶标第二位点的抑制素A抗体的酶结合物、第一缓冲液、第二缓冲液、发光底物、浓缩洗液。本发明利用包被有抑制素A抗体的磁微粒混悬液和酶标第二位点的抑制素A抗体的酶结合物分别与样本中抑制素A抗原上的两个抗原决定簇结合，形成固相抗体‑抗原‑酶标抗体的免疫复合物，再加入发光底物，显色后根据校准品标准曲线回算即可确定血浆内抑制素A抗原含量。本发明充分利用了磁性分离技术的快速易自动化性，化学发光技术的高灵敏度性，以缩短检测时间，提高检测准确性。

主权项：1.一种检测血浆中抑制素A含量的试剂盒，其特征在于由如下成分组成：包被有第一位点的抑制素A抗体的磁微粒混悬液25μL、酶标第二位点的抑制素A抗体的酶结合物150μL、校准品50μL、第一缓冲液500μL、第二缓冲液800μL、发光底物130μL、浓缩洗液1000μL；所述第一缓冲液的制备方法为：S1、取8.0gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4、0.24gKH2PO4、0.25gBaOH2溶于800mL蒸馏水中；S1.1，用pH值为5.5的HCl溶液调节溶液的pH值直至7.7；S1.2，最后加蒸馏水定容至1L即可得第一缓冲液；所述酶标第二位点的抑制素A抗体的酶结合物的制备方法为：S2、称取1.5mg辣根过氧化物酶溶解于1ml、1mMpH5.6的醋酸盐缓冲液中，加入同时10μLC102H151O39N31、10μLMgSO4、20μLC5HO2NS静置20min过滤沉淀，再加入1％DNFB无水乙醇溶液0.1ml，室温下轻微搅拌1h得第一溶液；S2.1、将第一溶液中加入0.2ml新配的0.1molL的NaIO4溶液，室温下避光搅拌20分钟，再加入抑制素A抗体80μL和第二缓冲液调节溶液的pH值至9.0并静置12h，再加入2.5％乙二醇1ml，室温下轻微搅拌1h，终止反应得第二溶液；S2.2、在第二溶液中加入硼氢化钠溶液0.1ml，混匀，常温状态下放置3h得第三溶液；S2.3、将第三溶液用第一缓冲液透析12h，期间每4小时更换一次第一缓冲液得第四溶液；S2.4、将第四溶液在3000rmin的速度下离心30min，过滤沉淀物得第五溶液；S2.5、在第五溶液中收集上层清液加入第二位点的抑制素A抗体，制成酶标第二位点的抑制素A抗体的酶结合物。

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