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申请/专利权人：新泰市佳禾生物科技有限公司;汕头市佳禾生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种色氨酸脱羧酶基因原核表达载体，由如下方法构建而成：1以pEGX‑4T‑1为出发质粒，将pEGX‑4T‑1利用pflmⅠ和btgⅠ双酶切之后连入长度为100bp的人造链，构建得到质粒pEGX‑4T‑J；2将编码水稻色氨酸脱羧酶的基因进行密码子优化，优化后的水稻色氨酸脱羧酶的编码基因序列如SEQIDNO.1所示；3采用SpeⅠ和Bsc91Ⅰ对质粒pEGX‑4T‑J进行双酶切处理，通过DNA连接酶将SEQIDNO.1所示的核苷酸片段连入双酶切后的质粒pEGX‑4T‑J上，即构建得到色氨酸脱羧酶基因原核表达载体。采用本发明构建的色氨酸脱羧酶基因原核表达载体可以显著提高色氨酸脱羧酶的表达量。
主权项：1.一种色氨酸脱羧酶基因原核表达载体pGEX-4t-J的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：以质粒pGEX-4T-1为出发质粒，先采用pflmⅠ在3250位点处进行单酶切，3’末端再切2个，5’末端切6个，3’末端加A，5’末端加CTAGT；再保护；再用btgⅠ在4869位点处进行单酶切，5’末端切4个再加AAGA，去掉所有的保护；再加上5’-CTAGT……G-3’的全长100bp的人造链，人造链中间省略的序列，其只要不包含SpeⅠ和Bsc91Ⅰ两个酶切位点，中间省略的序列可任意选择，构建得到表达载体pGEX-4t-J。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 新泰市佳禾生物科技有限公司 汕头市佳禾生物科技有限公司 色氨酸脱羧酶基因原核表达载体及其应用
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