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申请/专利权人：中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院

摘要：本发明公开了一种人肠道菌群球杆菌比值快速确定方法及系统，涉及微生物检测技术领域。本发明提出了利用染色后的球杆菌群的面积配合每种染色后的数量推理，得到常规情况下的数量比值，利用常规数量的比值得出常规数量比值的平均比值，然后再根据实际情况中的染色图像面积推算该图片中的球杆菌数量比值，得出较为准确的球杆菌比值结果，达到精准测定的效果，相比单纯的染色方法本申请的方法能够更为方便快捷的推算出较为详细的菌群比值，便于后期对于腹泻等的病症推理。

主权项：1.一种人肠道菌群球、杆菌比值快速确定方法，其特征在于，包括以下步骤：S01、粪便样本采集、存放与标记：收集目标人群的待测粪便，取适量的粪便末端作为粪便样本，并将粪便样本放入采集管中加入适量的粪便保存液摇匀，标记粪便样本用户信息；S02、在上位机中设定正常健康人群粪便样本中的球菌、杆菌比例正常值；S03、然后将腹泻人群的样本经过革兰氏染色实验，通过光学显微镜仪器取得染色后的图片信息，同时将图片信息通过MATLAB软件中的颜色占比功能得出染色后的菌群颜色范围占比；S04、再将相对于颜色占比的样品进行粪便样本处理与检测：取粪便样本上清液，加入标定量的内参菌株Sa，采用磁珠法粪便DNA提取试剂盒提取核酸，设置阴性对照组、内参菌株组和若干标准组测定每组浓度后进行荧光PCR检测，并根据详细的数据信息得出球菌和杆菌的比值；S05、利用图片的菌群颜色占比和相对于图像的菌群数量，推算出平均比值，具体如下：每种染色的菌群中会出现球杆菌混合的情况，根据这种情况将每种数量的球杆菌分出，每个腹泻患者的染色为蓝色球杆菌数量为和、紫色球杆菌数量为和、染色为红色的球杆菌数量为和；蓝色球杆菌数量为和、紫色球杆菌数量为和、染色为红色的球杆菌数量为和；......以此类推，最终根据球杆菌的数量比值确定每一位腹泻人群的染色图像面积中各颜色的球杆菌比值，染色为蓝色球杆菌比值为：：、：、.....以此类推染色为紫色球杆菌比值为：和、：、.....以此类推染色为红色球杆菌比值为：和、：、.....以此类推然后将各颜色部分的比值求取平均比值，如下式：蓝色区域球杆菌的平均比值为： 紫色区域球杆菌的平均比值为： 红色区域球杆菌的平均比值为： 为了方便上式的计算将公式简化如下：蓝色区域球杆菌的平均比值为：紫色区域球杆菌的平均比值为：红色区域球杆菌的平均比值为：S06、然后根据实际图像颜色占比，快速检测菌的含量，确定球菌、杆菌比值，具体如下所示：得出每种颜色中的球杆菌数量之和的比值，最终得到实际图像的球杆菌比值，统计检测菌的含量，确定球菌、杆菌比值，确定检测粪便样本与健康人群的菌群比值范围差异；具体比值如下式表示：a+b+c：a+b+c根据此式可以更为方便快捷的推算出较为详细的菌群比值；S07、在上位机中统计检测菌的含量，确定球菌、杆菌比值，确定检测粪便样本与健康人群的菌群比值范围差异。

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