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申请/专利权人：山西医科大学
摘要：本发明公开了一种基于蛋白沉淀‑液质联用的生物检材血浆和肝脏中5种鹅膏毒肽：α‑鹅膏毒肽、β‑鹅膏毒肽、γ‑鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、二羟鬼笔毒肽的检测方法，属于鹅膏肽类毒素检测技术领域。本发明建立了生物检材中蛋白沉淀的前处理方法，通过液质联用，实现了血浆和肝脏样品中α‑鹅膏毒肽、β‑鹅膏毒肽、γ‑鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鬼笔毒肽的定性和定量检测。本发明建立的五种鹅膏毒肽的样品前处理和HPLC‑MSMS检测方法，简单快速，所需检材量少，经济方便，方法灵敏度高，应用性强，能够满足五种鹅膏肽类毒素引起的毒蕈中毒案件的法医毒物分析要求。
主权项：1.一种生物检材中鹅膏肽类毒素的定性检测方法，其特征在于，所述的鹅膏肽类毒素为：α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鬼笔毒肽；具体步骤如下：1样品前处理：取空白生物基质，加内标，接着加入甲酸乙腈溶液沉淀蛋白，涡旋振荡，冰水浴超声，第一次离心取上清，氮气流吹干，初始流动相复溶，第二次离心取上清，0.22μm过滤膜过滤，得到前处理样品；2采用超高效液相色谱串联质谱检测，检测条件如下：液相条件为：流动相A相为5mmolL的甲酸铵水溶液，B相为甲醇，流速为0.3mLmin，采用梯度洗脱模式，初始为体积百分数15％B，保持1.5min，随后在3.5min内线性升高到体积百分数45％B，接着在0.1min内升高到体积百分数95％B并维持1.9min，随后在0.1min内下降到体积百分数15％B并维持2.9min；质谱条件为：选择两对离子对919.2→259.286.2、920.3→259.185.7、903.3→243.185.8、847.3→157.386.0、789.3→157.186.1分别对α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、二羟鬼笔毒肽进行定性；3取生物检材，按照步骤1的前处理方法和步骤2的检测条件进行处理和检测，根据定性离子对保留时间，相对丰度比定性，判断生物检材中是否含有所述的鹅膏肽类毒素。
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百度查询： 山西医科大学 一种生物检材中鹅膏肽类毒素的检测方法
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