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申请/专利权人：首都医科大学附属北京天坛医院
摘要：本发明提供了一种构建Map3k3I441M突变敲入转基因小鼠模型的方法及应用。方法包括：将小鼠的1号外显子至部分2号内含子替换为突变型基因片段，所述突变型基因片段的序列如序列表中SEDIDNO：1所示；以BCA克隆为模板，扩增出含有同源臂的小鼠基因组片段，作为打靶载体；将Cas9和gRNA与所述打靶载体共同注射到受精卵中；所述受精卵经过生产，得到阳性F0代样本；将所述阳性F0代样本合笼繁殖，得到F1代样本；将所述F1代样本进行基因分型，筛选出Map3k3I441M样本；将所述F1代样本中的Map3k3I441M样本与Cdh5‑CreERT工具样本进行交配，生产F2代样本。该构建方法构建出的模型能够准确反映出小鼠体内的真实情况。
主权项：1.一种构建Map3k3I441M突变敲入转基因小鼠模型的方法，其特征在于，所述方法包括：将小鼠中的1号外显子至部分2号内含子替换为突变型基因片段，所述突变型基因片段的序列如序列表中SEDIDNO：1所示；以BCA克隆为模板，扩增出含有同源臂的小鼠基因组片段，作为打靶载体；将Cas9mRNA和gRNA与所述打靶载体共同注射到受精卵中；所述受精卵经过生产，得到阳性F0代样本；将所述阳性F0代样本合笼繁殖，得到F1代样本；将所述F1代样本进行基因分型鉴定，得到Map3k3I441M阳性样本；将所述Map3k3I441M阳性样本与Cdh5-CreERT工具样本进行交配，生产得到所述靶向内皮细胞的Map3k3I441M突变敲入转基因小鼠模型。
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权利要求：
百度查询： 首都医科大学附属北京天坛医院 一种构建Map3k3I441M突变敲入转基因小鼠模型的方法及应用
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