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申请/专利权人:华南农业大学
摘要:本发明提供了一种重组猪瘟病毒Npro蛋白、抗猪瘟病毒Npro蛋白的多克隆抗体及其制备方法与应用。所述重组猪瘟病毒Npro蛋白为采用SEQIDNo.2所示经密码子优化的Npro基因与原核表达载体重组,并诱导原核表达,纯化,得到重组Npro蛋白,该重组Npro蛋白纯度高、具有良好的免疫原性,可作为ELISA包被的抗原和制备抗体。进一步将重组Npro蛋白免疫动物,制备得到抗猪瘟病毒Npro蛋白多克隆抗体,所述抗猪瘟病毒Npro蛋白的多克隆抗体特异性良好、效价高、灵敏度高,抗体效价达到1:128000以上,能够应用于ELISA和Westernblot检测,为猪瘟病毒的研究和诊断提供了有效工具。
主权项:1.一种重组猪瘟病毒Npro蛋白的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.合成密码子优化后的猪瘟病毒Npro基因,所述密码子优化后的猪瘟病毒Npro基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示;S2.将步骤S1优化后合成的猪瘟病毒Npro基因插入到原核表达载体中,得到重组原核表达质粒,再转入到大肠杆菌中,获得重组表达菌株;S3.将步骤S2中重组表达菌株加入IPTG诱导表达,纯化、复性,得到重组猪瘟病毒Npro蛋白。
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百度查询: 华南农业大学 一种重组猪瘟病毒Npro蛋白、抗猪瘟病毒Npro蛋白的多克隆抗体及其制备方法与应用
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