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申请/专利权人：华中农业大学
摘要：本发明公开了一种基于过表达转录因子提高猪克隆效率的载体及方法，涉及哺乳动物体细胞克隆技术领域。本发明提供的载体为猪转录因子LEUTX的体外转录载体，应用该载体可体外获取大量该转录因子LEUTX的mRNA。在猪体细胞克隆胚电激活后5h，通过向克隆胚显微注射LEUTX的mRNA，可以有效增强体细胞克隆胚组蛋白乙酰化H3K27ac这一表观遗传修饰的富集水平，显著促进猪体细胞克隆囊胚的体外发育，胚胎移植后克隆猪的出生率也显著提高。
主权项：1.一种基于过表达转录因子提高猪克隆效率的方法，其特征在于，所述方法为显微注射LEUTXmRNA，即在猪克隆胚中过表达转录因子LEUTX；所述LEUTXmRNA的制备方法为，通过ScaI限制性核酸内切酶进行单酶切得到线性化的载体，再以此为模板通过体外转录实验得到LEUTXmRNA；所述载体为插入有猪LEUTX基因读码框的pcDNA3.1+载体；所述猪LEUTX基因读码框的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示；所述猪LEUTX基因末端添加Kozak序列和酶切位点；所述载体用于通过体外转录制备LEUTXmRNA；所述载体包含体外转录实验所必须的T7启动子元件。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华中农业大学 一种基于过表达转录因子提高猪克隆效率的载体及方法
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