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申请/专利权人:演生潮(北京)生物科技有限公司
摘要:本发明涉及生物学技术领域,尤其涉及一种基于生物学活性评价的纳米抗体快速筛查方法,本发明采用高效的亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等多步纯化技术,保证纳米抗体的高纯度;采用纯度和活性检测手段,对产品进行全面、精确的质量控制,为纳米抗体提供高纯度和高活性;在高亲和力和高特异性方面,引入高通量筛选系统,能够同时处理大量候选纳米抗体样品,大幅提高筛选效率;根据建立的标准化的亲和力和特异性评价流程,使得筛选出的抗体具备高亲和力和高特异性;利用噬菌体展示技术,构建包含大量候选抗体的展示文库,通过高效筛选获得与目标抗原具有高亲和力和高特异性的抗体。
主权项:1.一种基于生物学活性评价的纳米抗体快速筛查方法,其特征在于,包括:步骤S1,抗原免疫,使用骆驼科动物进行抗原免疫,产生针对目标抗原的重链抗体,免疫周期为4-6周,每次免疫间隔为1周;步骤S2,抗体发现和制备,从免疫动物中采集血液,分离B细胞,并通过RT-PCR技术扩增重链抗体的可变区VHH基因;步骤S3,抗体筛选,通过噬菌体展示技术筛选出与目标抗原具有高亲和力的纳米抗体;步骤S4,生物学活性评价,对筛选出的纳米抗体进行系统的生物学活性评价;步骤S5,纳米抗体的制备,选择生物学活性评价结果最优的纳米抗体,进行大规模生产;步骤S6,纳米抗体的剂型和产量,将制备的纳米抗体制备成注射剂或冻干粉剂型,每剂量含1-10mg纳米抗体。
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