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申请/专利权人:中国医科大学附属第一医院;大连理工大学
摘要:本发明属于细胞培养观察领域,提供了一种振动刺激诱导内皮细胞形态及功能改变的实验观测平台的搭建方法,以培养皿为基础,通过对培养皿进行底部切割、硅胶旋涂、内皮细胞培养,获得含有内皮细胞的柔性硅胶薄膜的培养皿,并设计了培养皿固定装置结合激振器,得到用于观察振动刺激诱导内皮细胞形态及功能改变的装置。本发明改进了传统的细胞实验观测平台,解决了传统试验装置无法评估管壁周期性振动对内皮细胞功能影响的难题。本发明的观测平台可以很好地进行基于振动刺激的内皮细胞的形态及功能影响的实验研究。
主权项:1.一种振动刺激诱导内皮细胞形态及功能改变的实验观测平台的搭建方法,其特征在于,步骤如下:步骤1、在培养皿的中心处切割出一个圆孔,处理圆孔边缘毛刺使其平滑平整;步骤2、在亚克力板上裁出与步骤一中圆孔大小相同的亚克力圆片,撕去表面的保护膜,确保亚克力板与培养皿底部具有相同的厚度;步骤3、将亚克力圆片置于培养皿圆孔处,并在培养皿外侧用胶布将两者固定,并确保圆孔与亚克力圆片间隙密封良好;步骤4、配置透明硅胶溶液,计算滴入培养皿内的硅胶溶液的体积,并滴入处理好的培养皿中;步骤5、将含有硅胶溶液的培养皿固定在旋转平台上,在一定转速下,使培养皿内形成一层均匀厚度的透明硅胶软膜;步骤6、等待硅胶膜固化后,撕开胶布,取下培养皿底部的亚克力圆片,即得到用于培养内皮细胞并施加振动刺激的实验观测平台;步骤7、使用3d打印机为培养皿打印培养皿的固定装置,并将实验观测平台固定在固定装置内;步骤8、对固定在固定装置内的实验观测平台进行消毒灭菌,并在硅胶表面培养细胞;步骤9、将培养好细胞的实验观测平台连同固定装置一并放置在可调节高度的铁架台上并用夹具夹紧;步骤10、在实验观测平台的正下方设置振动位移和振动波形可调的激振器。
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