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一种黄原胶填料及制备方法和应用 

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申请/专利权人:大连工业大学

摘要:本发明涉及蛋白质纯化填料的制备技术领域,尤其涉及一种黄原胶微球填料及制备方法和应用,其由质量比为1:1‑1:4的聚乙烯醇与黄原胶组成。所制备的黄原胶基微球绿色环保、无毒、可降解、生物相容性好,得到的微球粒径均一,表面光滑;其原料黄原胶价格低廉,性能稳定。

主权项:1.一种黄原胶填料在蛋白酶液中初步分离大肠杆菌表达的葡萄糖苷酶过程的应用,其特征在于:由质量比为1:1-1:4的黄原胶与聚乙烯醇组成;制备方法包括以下步骤:S1:将聚乙烯醇溶解在70-100℃的热水中,冷却至室温后,加入黄原胶搅拌5-16h,作为水相;黄原胶与聚乙烯醇质量比为1:1-1:4;水相中聚乙烯醇与黄原胶质量之和的浓度为1-4%,wv,gmL;S2:将油相和乳化剂加入水相中,用搅拌器以800rpmmin-5000rpmmin搅拌40min-4h;油相为液体石蜡、甲苯、环己烷中的一种或二种以上;乳化剂为span80,其为油相质量的1-8%;水相在搅拌后的体系中的体积1-40%;S3:加入占S2获得体系体积的4×10-6-4×10-4%的戊二醛,及1-2mL1-2M硫酸,继续以800rpmmin-5000rpmmin搅拌40min-4h;S4:用80-95℃热乙醇洗涤,去除油相,得到黄原胶微球填料;或,用溶剂和蒸馏水分别洗涤,去除油相;然后将制备的微球在室温~50℃下干燥1-24h,得到黄原胶微球填料;将黄原胶基微球作为填料,经过离子交换剂预处理对蛋白进行纯化并验证纯化效果。

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