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申请/专利权人:无锡市食品安全检验检测中心;江南大学
摘要:本发明公开了质谱定量检测多肽产品中酪蛋白糖巨肽的标准特征多肽序列,属于检验检测技术领域。由于酪蛋白糖巨肽具有多种可能的糖基化修饰,故对其质谱定量难度较大。本发明对样品脱脂、沉淀蛋白后,通过酶切酪蛋白糖巨肽得到不含糖基化修饰位点的标准特征多肽序列,以精准的质量数避免了糖基化对于酪蛋白糖巨肽定量的影响。本发明筛选得到三条用于定量检测酪蛋白糖巨肽的多肽,氨基酸序列分别如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3所示,其中,目标肽段3表现出更高的特异性,更适合用于定量分析待测样本中酪蛋白糖巨肽的含量。本发明实现了酪蛋白糖巨肽的精准定量分析,可用于确定产品中酪蛋白糖巨肽的含量是否达标。
主权项:1.一种定量检测酪蛋白糖巨肽的方法,其特征在于,所述方法的具体步骤如下:(1)前处理:使用低极性有机溶剂处理待检测样品,收集水相,使用蛋白酶K酶解后终止反应,经滤膜过滤后,得到样品前处理液;(2)检测酪蛋白糖巨肽:利用质谱技术检测样品前处理液中的多肽,获得待检测样品中多肽的离子流色谱图和质谱图;(3)含量计算:将步骤(2)中多肽的离子流色谱图的峰面积带入标准曲线分析计算,从而获得待检测样品中酪蛋白糖巨肽的含量;所述多肽的氨基酸序列为EDSPEV。
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权利要求:
百度查询: 无锡市食品安全检验检测中心 江南大学 质谱定量检测多肽产品中酪蛋白糖巨肽的标准特征多肽序列
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