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一种多靶标RNA放大检测方法及检测试剂盒 

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申请/专利权人:上海仁度生物科技股份有限公司

摘要:本发明公开一种多靶标RNA方法检测方法及检测试剂盒,属于RNA检测技术领域。提供的多靶标RNA方法检测方法包括多靶标RNA提取、第一阶段扩增反应、第二阶段扩增反应和荧光检测步骤,其中在第二阶段扩增反应中将第一阶段扩增反应的产物分装为多个反应单元,并向各反应单元中分别加入与多靶标RNA中各靶标RNA对应的检测液2进行单独荧光检测,能够高灵敏度检出待测样品中的多个靶标RNA,而且该方法仅需要一次多靶标RNA提取操作和一次第一阶段扩增反应操作,因此还可以明显提高检测效率。

主权项:1.一种非疾病诊断目的的多靶标RNA放大检测方法,其包括以下步骤:1多靶标RNA提取:将待测样品与核酸提取液混合,提取所述待测样品中的多靶标RNA,得到RNA样品;其中所述核酸提取液包含与所述多靶标RNA中每一靶标RNA特异的第一引物和捕获探针,所述第一引物的3’端序列为与对应的靶标RNA特异性结合的序列,5’端序列为启动子序列,所述捕获探针用于捕获对应的靶标RNA;2第一阶段扩增反应:向步骤1得到的RNA样品中加入检测液1和酶液,混匀后反应,得到第一阶段扩增产物;其中所述检测液1包含与所述多靶标RNA中每一靶标RNA特异的第二引物,所述第二引物用于与所述第一引物配合来扩增对应的靶标RNA,且所述酶液含有逆转录酶和RNA聚合酶;3第二阶段扩增反应和荧光检测:将步骤2得到的第一阶段扩增产物进行分装,使得分装后的反应单元的数量不低于多靶标RNA的种类数量,分别向分装后的反应单元中加入针对不同靶标RNA的检测液2,混匀后进行恒温放大反应和荧光检测,分别得到各靶标RNA的定性判定结果;其中针对不同靶标RNA的检测液2包含与其所针对的靶标RNA对应的第一引物和靶标检测探针。

全文数据:

权利要求:

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