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申请/专利权人：武汉明德生物科技股份有限公司

摘要：本发明公开了一种基于三代靶向测序检测RNA病毒的组合物、试剂盒及其应用，属于生物检测技术领域。本发明中的检测包括如下步骤：S1、提取RNA病毒核酸后，进行逆转录，得到cDNA；S2、使用上述组合物对cDNA进行扩增，得到扩增产物，扩增产物经处理后，建库，得到混合文库；S3、将混合文库中的扩增产物连接接头序列，得到待测样品；S4、对待测样品进行测序，并分析检测结果。本发明能同时扩增75种病原微生物，然后采用三代靶向测序，能快速准确地对上述75种病原微生物进行区分鉴定。

主权项：1.一种基于三代靶向测序检测RNA病毒的组合物，其特征在于，包括如下所示引物组中的至少2种组合：如SEQIDNO:1～6所示的扩增风疹病毒的引物组；如SEQIDNO:7～12所示的扩增登革热病毒2型的引物组；如SEQIDNO:13～18所示的扩增登革热病毒3型的引物组；如SEQIDNO:19～24所示的扩增柯萨奇病毒B6型的引物组；如SEQIDNO:25～30所示的扩增人类嗜T细胞病毒I型的引物组；如SEQIDNO:31～38所示的扩增柯萨奇病毒B2型的引物组；如SEQIDNO:39～44所示的扩增蜱传脑炎病毒的引物组；如SEQIDNO:45～48所示的扩增黄热病毒的引物组；如SEQIDNO:49～54所示的扩增柯萨奇病毒B5型的引物组；如SEQIDNO:55～60所示的扩增人类冠状病毒229E的引物组；如SEQIDNO:61～68所示的扩增戊型肝炎病毒的引物组；如SEQIDNO:69～74所示的扩增新疆出血热病毒的引物组；如SEQIDNO:75～80所示的扩增SARS病毒的引物组；如SEQIDNO:81～90所示的扩增萨比亚病毒的引物组；如SEQIDNO:91～96所示的扩增人类冠状病毒OC43的引物组；如SEQIDNO:97～102所示的扩增柯萨奇病毒A2型的引物组；如SEQIDNO:103～110所示的扩增柯萨奇病毒A9型的引物组；如SEQIDNO:111～116所示的扩增肠道病毒D70型的引物组；如SEQIDNO:117～120所示的扩增丙型流感病毒的引物组；如SEQIDNO:121～130所示的扩增裂谷热病毒的引物组；如SEQIDNO:131～138所示的扩增人鼻病毒A的引物组；如SEQIDNO:139～148所示的扩增人副肠孤病毒1型的引物组；如SEQIDNO:149～156所示的扩增柯萨奇病毒A16型的引物组；如SEQIDNO:157～168所示的扩增人副流感病毒4b型的引物组；如SEQIDNO:169～176所示的扩增人星状病毒的引物组；如SEQIDNO:177～184所示的扩增鹅口疮冠状病毒HKU12的引物组；如SEQIDNO:185～190所示的扩增穆尼亚冠状病毒HKU13的引物组；如SEQIDNO:191～198所示的扩增人副肠孤病毒3型的引物组；如SEQIDNO:199～206所示的扩增肠道病毒A71型的引物组；如SEQIDNO:207～214所示的扩增人类偏肺病毒的引物组；如SEQIDNO:215～222所示的扩增柯萨奇病毒A6型的引物组；如SEQIDNO:223～232所示的扩增人免疫缺陷病毒的引物组；如SEQIDNO:233～248所示的扩增甲型流感病毒H7N9的引物组；如SEQIDNO:249～258所示的扩增埃博拉病毒的引物组；如SEQIDNO:259～268所示的扩增肠道病毒D68型的引物组；如SEQIDNO:269～278所示的扩增新型布尼亚病毒的引物组；如SEQIDNO:279～288所示的扩增人呼吸道合胞病毒B型的引物组；如SEQIDNO:289～296所示的扩增丙型肝炎病毒1b亚型的引物组；如SEQIDNO:297～302所示的扩增乙型脑炎病毒的引物组；如SEQIDNO:303～312所示的扩增人类嗜T细胞病毒II型的引物组；如SEQIDNO:313～320所示的扩增甲型肝炎病毒的引物组；如SEQIDNO:321～328所示的扩增柯萨奇病毒B3型的引物组；如SEQIDNO:329～334所示的扩增人呼吸道合胞病毒A型的引物组；如SEQIDNO:335～342所示的扩增人轮状病毒A的引物组；如SEQIDNO:343～348所示的扩增登革热病毒1型的引物组；如SEQIDNO:349～360所示的扩增人鼻病毒B的引物组；如SEQIDNO:361～370所示的扩增麻疹病毒的引物组；如SEQIDNO:371～378所示的扩增狂犬病病毒的引物组；如SEQIDNO:379～388所示的扩增人副流感病毒3型的引物组；如SEQIDNO:389～400所示的扩增甲型流感病毒H1N1的引物组；如SEQIDNO:401～406所示的扩增腮腺炎病毒的引物组；如SEQIDNO:407～412所示的扩增乙型流感病毒的引物组；如SEQIDNO:413～420所示的扩增登革热病毒4型的引物组；如SEQIDNO:421～430所示的扩增人副流感病毒2型的引物组；如SEQIDNO:431～440所示的扩增人副流感病毒1型的引物组；如SEQIDNO:441～456所示的扩增东方马脑炎病毒的引物组；如SEQIDNO:457～466所示的扩增版纳病毒的引物组；如SEQIDNO:467～476所示的扩增淋巴脉络丛脑膜炎病毒的引物组；如SEQIDNO:477～482所示的扩增汉坦病毒的引物组；如SEQIDNO:483～490所示的扩增人类冠状病毒NL63的引物组；如SEQIDNO:491～500所示的扩增甲型流感病毒H5N1的引物组；如SEQIDNO:501～510所示的扩增甲型流感病毒H3N2的引物组；如SEQIDNO:511～518所示的扩增人鼻病毒C的引物组；如SEQIDNO:519～524所示的扩增寨卡病毒的引物组；如SEQIDNO:525～532所示的扩增肠道病毒A114的引物组；如SEQIDNO:533～540所示的扩增柯萨奇病毒B3型的引物组；如SEQIDNO:541～548所示的扩增诺如病毒的引物组；如SEQIDNO:549～560所示的扩增2019新型冠状病毒的引物组；如SEQIDNO:561～568所示的扩增人类冠状病毒HKU1的引物组；如SEQIDNO:569～574所示的扩增埃可病毒的引物组；如SEQIDNO:575～580所示的扩增脊髓灰质炎病毒1的引物组；如SEQIDNO:581～586所示的扩增脊髓灰质炎病毒3的引物组；如SEQIDNO:587～594所示的扩增脊髓灰质炎病毒1的引物组；如SEQIDNO:595～604所示的扩增肠道病毒D68型的引物组；如SEQIDNO:605～608所示的扩人冠状病毒HKU1的引物组。

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