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申请/专利权人:华中科技大学;深圳华中科技大学研究院
摘要:本发明公开了一种m6A依赖型限制性内切酶、其突变体及其应用,属于微生物核酸内切酶技术领域。本发明提供了一种野生型m6A依赖型限制性内切酶HHPV4I的应用方法,会提供了其两个突变体ΔSRA和K197A。这三种限制性内切酶都能特异性地识别并且切割含有m6A修饰的DNA,且野生型HHPV4I和突变体ΔSRA可以特异性识别Gm6ATC修饰位点,并在修饰位点两侧的位置切割DNA。利用其特殊的限制性内切功能,能够应用于基因工程、基因分析、基因编辑、基因检测、表观遗传学研究等技术领域。
主权项:1.一种m6A依赖型限制性内切酶的应用,其特征在于,所述m6A依赖型限制性内切酶为野生型m6A依赖型限制性内切酶HHPV4I,或野生型m6A依赖型限制性内切酶HHPV4I突变体ΔSRA,或m6A依赖型限制性内切酶突变体K197A;所述野生型m6A依赖型限制性内切酶HHPV4I的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示;所述m6A依赖型限制性内切酶突变体ΔSRA的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示;所述m6A依赖型限制性内切酶突变体K197A的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示;使用野生型m6A依赖型限制性内切酶HHPV4I或m6A依赖型限制性内切酶突变体ΔSRA时,对DNA中含有甲基化位点Gm6ATC进行特异性切割,或者消化去除DNA样品中含有m6A修饰的DNA,或者分析DNA样品中GATC位点甲基化水平;使用m6A依赖型限制性内切酶突变体K197A时,对DNA中所有含m6A修饰的位点进行切割。
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权利要求:
百度查询: 华中科技大学 深圳华中科技大学研究院 一种m6A依赖型限制性内切酶、其突变体及其应用
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