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申请/专利权人：浙江工业大学
摘要：本发明公开了一种脂肪酶在水解短链脂肪酸酯类化合物中的应用，具体操作过程为：对脂肪酶菌株进行扩增，在中性红油脂平板培养基上接种不同的脂肪酶菌株，挑取产生荧光圈的单菌落进行纯化培养，然后通过水解短链脂肪酸酯类化合物进行复筛，确定显色为红色的脂肪酶具有水解短链脂肪酸酯类化合物的性能。本发明的应用方法可以用于筛选催化特定短链脂肪酸酯类的脂肪酶，该方法颜色反应直观、显色时间短，操作方便。
主权项：1.一种脂肪酶在水解短链脂肪酸酯类化合物中的应用，其特征在于，包括如下步骤：1将预选的脂肪酶菌株用相应的液体培养基进行扩增培养、离心，收集含酶的培养基上清液；2在中性红油脂平板培养基上接种不同的酶液，记录产生荧光圈的酶液所对应的菌株，再进行培养；3以如式I所示的酯类化合物为原料溶解在有机溶剂中，向反应器中加入通过步骤2初筛的酶和缓冲液，反应水解得到如式II所示的化合物和如式Ⅳ所示的化合物的混合物，反应结束后加入碱将反应淬灭，中和化合物Ⅳ，将反应混合液离心后取上清液加入到96孔板中，再添加TTC进行显色，确定显色为红色处的脂肪酶具有水解短链脂肪酸酯类化合物的性能，即式II所示的化合物被氧化为如式III所示的化合物，TTC被还原为TPF，反应过程如下： 式中，取代基R1为甲基、乙基或苯基，取代基R2为甲基。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江工业大学 脂肪酶在水解短链脂肪酸酯类化合物中的应用
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