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申请/专利权人：青岛大学
摘要：本发明属于核酸提取技术领域，具体涉及一种基于硅藻壳的快速核酸提取方法。本发明是一种利用硅藻壳表面巨大的比表面积和介孔结构来进行核酸提取和吸附的方法，具体是将硅藻壳与生物样本混合，硅藻壳可裂解生物样本使核酸释放，利用硅藻壳表面的硅羟基Si‑OH吸附和富集核酸，收集吸附核酸的硅藻壳作为检测靶标进行扩增反应检测。本发明操作简单，成本低，提取效率高，提取速度快，核酸产物质量高。
主权项：1.一种基于硅藻壳的快速核酸提取方法，其特征在于：将硅藻壳与生物样本混合，硅藻壳可裂解生物样本使核酸释放，并吸附和富集核酸，收集硅藻壳沉淀完成核酸提取；生物样本为口咽拭子浸提液或血清样本；硅藻壳与生物样本混合后，加入无机盐溶液，促进硅藻壳富集核酸；无机盐包括氯化镁或氯化钠，且镁离子和钠离子在提取体系中的终浓度分别为0.1-100mM和0.1-1000mM；硅藻壳为海洋单细胞硅藻；海洋单细胞硅藻为含硅质壳的海洋单细胞生物；含硅质壳的海洋单细胞生物为威氏海链藻、隐秘小环藻、假微型海链藻、舟形藻、卵形藻、斜纹藻、圆筛藻中的一种或多种；硅藻壳提纯方法的具体步骤如下：通过离心或过滤收集1L藻液，在硅藻泥中加入25mL浓硫酸，充分混匀后于60℃水浴加热45min，室温放置24h；继续加入等体积的浓硝酸，60℃加热至澄清，室温放置24h，通过筛绢过滤收集处理后的藻细胞，用蒸馏水洗涤5次，用无水乙醇洗涤5次，60℃烘至干燥即可得到纯净的硅藻壳；制备口咽拭子浸提液样本的方法：采集口咽拭子，采集完成后将拭子浸入含500μL生理盐水的离心管中，置于漩涡振荡器上振荡30sec，弃去咽拭子获得所述口咽拭子浸提液样本；制备血清的方法：将收集的血液样本置于不含抗凝剂的收集管内，在室温下自然凝集30-60min，待血液凝固，沿着收集管将血凝块轻轻划开，4℃放置过夜，待其平衡后，将收集管置于离心机中4℃离心，转速为3000rpm，时间为15min，离心结束后收集上清获得所述血清样本。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 青岛大学 基于硅藻壳的快速核酸提取方法
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