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申请/专利权人:云南伦扬科技有限公司
摘要:本发明公开了一种纳米酶基双荧光信号输出快速检测甲醛的方法,该方法制备了以Cu、Mn为中心的N掺杂碳纳米酶(Cu,Mn‑N‑C)。Cu,Mn‑N‑C具有过氧化物酶(POD)和抗坏血酸氧化酶(AAO)模拟活性,能氧化邻苯二胺(OPD)生成在564nm处有荧光的2,3‑二氨基吩嗪(DAP);同时Cu,Mn‑N‑C还能氧化抗坏血酸(AA)成脱氢抗坏血酸(DHAA),DHAA进一步与OPD反应生成喹喔啉(DFQ),在425nm处有荧光。而甲醛能与OPD形成席夫碱,对Cu,Mn‑N‑C催化有抑制作用。因此,本发明基于Cu,Mn‑N‑C的POD和AAO活性,开发了一种甲醛的双信号荧光探针,线性范围分别为1.85~111μgL和0.925~138.75μgL,检测限分别为0.84μgL和0.33μgL,远低于国家标准GB2758‑2012发酵酒及其配制酒中甲醛小于2mgL的限量要求,具有灵敏度高、特异性强、快速等特点。
主权项:1.一种纳米酶基双荧光信号输出快速检测甲醛的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将1.0-1.5g醋酸铜、0.75-1.0g醋酸锰及20-30mL甲醇与50-70g氯化钾搅拌混匀后,将干燥后固体与0.5-1.0g2-甲基咪唑、25-35mL甲醇混匀后,放置在80℃下真空干燥4-5h除去甲醇,得到的固体颗粒置于管式炉中,在氮气保护下750℃煅烧2-3h,得到的固体用0.1molL的H2SO4浸泡过夜后,用水洗涤至中性,得到不溶于水的黑色小颗粒,即为Cu,Mn-N-C纳米酶;(2)在Cu,Mn-N-C纳米酶溶液中加入邻苯二胺OPD、H2O2溶液及不同浓度的甲醛标准溶液、然后加入pH4.0HAc-NaAc缓冲溶液定容,反应5-10min后,在421nm激发波长及564nm发射波长处测定荧光强度,建立吸光度与甲醛浓度的定量关系,绘制标准曲线,得到回归方程;在Cu,Mn-N-C纳米酶溶液中加入邻苯二胺OPD、抗坏血酸AA溶液,加入pH6.0PB缓冲溶液反应2-5min,然后加入不同浓度的甲醛标准溶液,反应5-10min后,在346nm激发波长及424nm发射波长处测定荧光强度,建立吸光度与甲醛浓度的定量关系,绘制标准曲线,得到回归方程;(3)提取检测样品中甲醛,获得样品测定液,按照步骤(2)操作测定双荧光强度,代入回归方程,计算待测样品液中甲醛浓度。
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