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申请/专利权人:南方医科大学
摘要:本发明公开了一种植物外泌体及其制备方法和应用,在新鲜植物根茎中加入预冷的纯水,榨汁得到匀浆;再将匀浆在180×g~220×g条件下离心;取上清液,依次在1,800×g~2,200×g、11,500×g~12,500×g、94,500×g~95,500×g下离心;取上清液,依次通过孔径为0.45μm、0.2μm的微孔滤膜;取滤液,165,000×g~175,000×g条件下离心,弃上清;PBS重悬沉淀物,即得。采用本发明的制备方法可成功制备得到形态完整的植物外泌体,且所得的外泌体粒径集中,纯度高,得率较高,制备时间短,所得外泌体无细胞毒性,具有很好的体外抗炎作用,可为后续的科研实验与新药研发提供扎实基础。
主权项:1.一种植物外泌体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1、取部分新鲜植物根茎,加入其重量0.8~1.2倍的预冷的纯水或PBS缓冲液,榨汁得到匀浆;再在剩余新鲜植物根茎中加入所述匀浆,继续榨汁;2、在180×g~220×g条件下离心8min~12min;3、取步骤2上清液,在1,800×g~2,200×g条件下离心25min~35min;4、取步骤3上清液,在11,500×g~12,500×g条件下离心10min~20min;5、取步骤4上清液,在94,500×g~95,500×g条件下离心25min~35min;6、取步骤5上清液,依次通过孔径为0.45μm、0.2μm的微孔滤膜;7、取步骤6滤液,165,000×g~175,000×g条件下离心2.5h~3.5h,弃上清;8、PBS重悬沉淀物,即得。
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