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申请/专利权人:重庆医科大学
摘要:本发明提供一种人胚胎干细胞与胰腺癌干细胞共培养制备抗胰腺癌转移药物的方法。人胚胎干细胞具有全能性和多能性,其微环境已被证实具有影响肿瘤微环境并抑制其恶性生物学行为。肿瘤干细胞是肿瘤细胞中具有干性的细胞亚群,其与肿瘤的发生、增殖、转移、复发及耐药等密切相关且其生物学功能与人胚胎干细胞具有极大的相似度。发明人意外发现,将胰腺癌细胞中干性更高的胰腺癌干细胞亚群分离后与人胚胎干细胞进行共培养,其共培养上清液具有抑制胰腺癌细胞增殖、转移及降低肿瘤干性的能力,且共培养上清液在体外抑制胰腺癌侵袭与转移的方面表现出明显的优势,具有制备成抑制胰腺癌转移药物的潜力。
主权项:1.一种胰腺癌干细胞的分离培养方法,其特征在于,包括以下步骤:1取对数生长期的胰腺癌细胞,PBS清洗细胞2次后加入1~2mL胰蛋白酶,37℃消化1-2min,加入等体积DMEM完全培养基终止消化后,收集细胞,离心5min,1000rpm。2用胰腺癌干细胞培养基重悬细胞,接种于铺入3-4mL胰腺癌干细胞培养基的超低吸附培养板中,悬浮培养6-7d,3-4d时半换液一次。3第3d、7d时收集分离出的肿瘤干细胞球,以普通肿瘤细胞为对照,提取细胞总RNA后进行qRT-PCR实验验证肿瘤细胞干性相关因子CD24、CD44、EPCAM的表达水平差异。
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权利要求:
百度查询: 重庆医科大学 一种人胚胎干细胞与胰腺癌干细胞共培养制备抗胰腺癌转移药物的方法
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