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申请/专利权人:东北林业大学
摘要:本发明公开了一种利用CRISPRCas9系统编辑落叶松PDS基因的gRNA及其应用,涉及植物基因工程技术领域,本发明通过确定落叶松目的基因编辑位点,设计目的靶点的gRNA,然后将Cas9蛋白与落叶松目的基因gRNA混合,得到落叶松RNP复合物,最后采用基因介导的转化方式,将所述落叶松RNP复合物转化到落叶松胚性愈伤组织中,完成对落叶松愈伤组织的基因编辑,最终细胞转化成无转基因成分的落叶松基因编辑突变体,整个过程中不用构建Ti质粒,不涉及任何外源DNA,编辑方式更精准、且简单易行。
主权项:1.一种编辑落叶松PDS基因的gRNA,其特征在于,所述gRNA序列包括gRNA1、gRNA3和gRNA5;所述gRNA1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述gRNA3的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;所述gRNA5的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。
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百度查询: 东北林业大学 一种利用CRISPR/Cas9系统编辑落叶松PDS基因的g RNA及其应用
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