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口服微-纳CRISPR/Cas9编辑系统及其构建方法和应用 

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申请/专利权人:沈阳药科大学

摘要:本发明公开了口服微‑纳CRISPRCas9编辑系统及其构建方法和应用,属于医药技术领域。本发明以Cas9sgRNARNP为基因编辑药物,利用二硫交联剂对其进行交联以形成RNP纳米团簇;然后将大肠杆菌E.coliNissle1917EcN来源的去除脂多糖的细菌外膜囊泡dOMVs对RNP纳米团簇进行初次包被,最后在其外层进行海藻酸钙包被,制备了双层包被的基因递送系统,海藻酸钙和细菌外膜囊泡进行双层包被实现CRISPRCas9编辑系统的高效共载和同步递送。本发明的制备工艺简单,制剂粒径均一,有利于靶向至结肠组织;载药量高;安全性好。本发明的口服微‑纳CRISPRCas9编辑系统能显著提高Cas9sgRNARNP的体内基因编辑及抗炎效果。

主权项:1.一种CRISPRCas9编辑系统,其特征在于,所述的CRISPRCas9编辑系统为双层包被的核壳结构,内核为含TNF-α基因位点特异性的sgRNA与Cas9蛋白的纳米团簇RNP-NCs,外壳由内到外依次为大肠杆菌E.coliNissle1917所分泌的纳米级的细菌外膜囊泡dOMVs包被层与微米级的海藻酸钙微球包被层。

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权利要求:

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