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申请/专利权人：山西锦波生物医药股份有限公司
摘要：本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种检测样品中重组人源化胶原蛋白含量的方法，所述样品中含有重组人源化胶原蛋白和透明质酸钠；所述方法包括如下步骤：对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、液相色谱检测和数据分析。本发明提供的检测方法专属性强，当重组人源化胶原蛋白的含量在一定范围内时，其浓度与色谱峰面积具有良好的线性关系，准确度高，重复性好，检出限和定量限分别可达0.05mgml和0.1mgml。
主权项：1.一种检测样品中重组人源化胶原蛋白含量的方法，其特征在于，所述样品中含有重组人源化胶原蛋白和透明质酸钠；所述方法包括如下步骤：对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、液相色谱检测和数据分析；当所述样品中重组人源化胶原蛋白的含量大于等于0.5mgmL时，所述供试品溶液的制备包括如下稀释法所示的步骤：稀释法：精密称取样品，置容器中，加入纯化水或PBS溶液稀释3～4倍，即得；当所述样品中重组人源化胶原蛋白的含量小于等于1.0mgmL时，所述供试品溶液的制备包括如下酶解法所示的步骤：酶解法：精密称取样品，置容器中，加入透明质酸酶，混匀，置于4～6℃环境下进行酶解反应，即得；所述液相色谱检测采用的条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相为水-乙腈二元流动相系统，在所述水-乙腈二元流动相系统中，流动相A为三氟乙酸含量为0.1％vv的三氟乙酸水溶液，流动相B为三氟乙酸含量为0.1％vv的三氟乙酸乙腈溶液；洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序如下： 时间min 流动相A％vv 流动相B％vv 0→3 95 5 3→6 95→88 5→12 6→8 88→87 12→13 8→9 87→85 13→15 9→14 85→80 15→20 14→20 80→75 20→25 20→22 75→74.5 25→25.5 22→27 74.5→70 25.5→30 27→29 70→95 30→5 29→30 95 5
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权利要求：
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