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一种抗MAG抗体检测试剂及其制备方法和应用、利用该检测试剂的试剂盒及检测方法 

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申请/专利权人:北京深海特生物技术有限公司

摘要:本申请涉及抗体检测的技术领域,具体涉及一种抗MAG抗体检测试剂及其制备方法和应用、利用该检测试剂的试剂盒及检测方法。该制备方法具体包括以下步骤:构建包括带有编码MAG蛋白的核苷酸序列的重组质粒以及带有编号糖基转移酶B3GAT1的核苷酸序列的重组质粒;将重组质粒共转染至哺乳动物细胞,并置于低温下培养,获得表达糖基化MAG基因的细胞爬片;利用固定液固定表达糖基化MAG基因的细胞爬片,即得抗MAG抗体检测试剂。本申请对MAG进行糖基化修饰,糖基团会与蛋白质骨架结合,形成糖蛋白复合物,改变蛋白的结构,从而促进抗MAG抗体与抗原结合,提高了对抗MAG抗体的检出率和灵敏度。

主权项:1.一种抗MAG抗体检测试剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法具体包括以下步骤:(1)构建重组质粒;所述重组质粒包括带有编码MAG蛋白的核苷酸序列的重组质粒以及带有编号糖基转移酶B3GAT1的核苷酸序列的重组质粒;所述编码MAG蛋白的核苷酸序列包括如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列;所述编码糖基转移酶B3GAT1的核苷酸序列包括如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列;(2)将所述重组质粒共转染至哺乳动物细胞,并置于低温下培养,获得表达糖基化MAG基因的细胞爬片;所述哺乳动物细胞为HEK293T细胞;所述低温下培养所用的温度为25-35℃,培养时间为48-72h;(3)利用固定液固定所述表达糖基化MAG基因的细胞爬片,即得抗MAG抗体检测试剂。

全文数据:

权利要求:

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