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摘要:本发明提供了一种基于磷酸银纳米氧化酶活性比色检测亚硝酸盐的方法,利用磷酸银纳米颗粒Ag3PO4良好的氧化酶催化活性,将无色的TMB氧化生成蓝色TMB+,亚硝酸盐再与TMB+发生重氮反应,生成黄色产物,并在450nm处产生明显的吸收峰。本发明的检测方法具有准确、快速、特异性强、简便等优点,可以用于食品中亚硝酸盐的检测,其最低检测限度LOD为0.6μMSN=3,定量限LOQ为1.99μMSN=10,远低于国家标准,本发明还具有较好的灵敏度和稳定性,有望开发成检测试剂盒应用于实际生活中。
主权项:1.一种基于磷酸银纳米氧化酶活性比色检测亚硝酸盐的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、标准曲线制作将磷酸银纳米颗粒水溶液与3,3,5,5-四甲基联苯胺溶液加入到pH为3.0的醋酸钠缓冲液中,混合均匀,25℃孵育1min,得到蓝色的混合溶液A;取多个混合溶液A分别加入不同浓度的亚硝酸盐标准溶液反应至少120s,得到黄色的系列混合溶液,再取混合溶液A加入与亚硝酸盐标准溶液相同体积的纯净水制得系列混合溶液的空白对照溶液;检测系列混合溶液和空白对照溶液在450nm处吸光值,以系列混合溶液和空白对照溶液在450nm处吸光值的差值Δ450作为纵坐标,亚硝酸盐溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,得到标准曲线方程为: S2、样品测定将磷酸银纳米颗粒水溶液与3,3,5,5-四甲基联苯胺溶液加入到pH为3.0的醋酸钠缓冲液中,混合均匀,25℃孵育1min,得到混合溶液A;向混合溶液A中加入含亚硝酸盐的待测样品溶液反应至少120s,得到待测样品混合溶液,另取混合溶液A加入与待测样品溶液相同体积的纯净水得到空白对照溶液;检测待测样品混合溶液和空白对照溶液在450nm处吸光值,将待测样品混合溶液和空白对照溶液在450nm处吸光值的差值Δ450代入S1得到的标准曲线方程,计算得到待测样品中的亚硝酸盐的浓度。
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百度查询: 贵州省现代农业发展研究所(贵州省现代农村发展研究中心、贵州省农村经济与社会发展科学研究所、贵州省农产品加工研究所) 基于磷酸银纳米氧化酶活性比色检测亚硝酸盐的方法
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