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摘要:本申请提供一种扩增生产自然杀伤细胞的方法,属于自然杀伤细胞生产技术领域。扩增生产自然杀伤细胞的方法包括:将自然杀伤细胞接种于生物反应器内进行扩增培养,获取扩增培养后的自然杀伤细胞;且在扩增培养的过程中,向生物反应器内加入预处理液;扩增培养为封闭式培养。预处理液为第一处理液或和第二处理液。本申请的扩增生产自然杀伤细胞的方法可在短时间内获取大量的自然杀伤细胞,操作简单、工作强度低、扩增效率高、生产规模可灵活改变;使用预处理液可提高扩增生产获取的自然杀伤细胞的纯度;第二处理液可以继续用于后续扩增生产自然杀伤细胞,可节约成本;且第二处理液中细胞因子IFN‑γ的含量表达较为丰富,可应用于临床医学。
主权项:1.一种扩增生产自然杀伤细胞的方法,其特征在于,包括:将自然杀伤细胞接种于生物反应器内进行扩增培养,获取所述扩增培养后的自然杀伤细胞;且在所述扩增培养的过程中,向所述生物反应器内加入预处理液;所述扩增培养为封闭式培养;所述预处理液为第一处理液或和第二处理液;所述第一处理液的制备方法包括:将血样和生理盐水混合后于1000~1200rmin下进行第一离心;将所述第一离心后的沉淀物和生理盐水混合后,孵育2~3天;将所述孵育后的体系于1200~1400rmin下进行第二离心;对所述第二离心后的上清液依次进行第一过滤、第一浓缩脱盐和第一冷冻干燥,将所述第一冷冻干燥后的体系与无菌水混合;其中,所述血样为外周血或脐带血;所述第二处理液的制备方法包括:对所述扩增培养后的体系中的上清液依次进行第二过滤、第二浓缩脱盐和第二冷冻干燥,将所述第二冷冻干燥后的体系与无菌水混合。
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百度查询: 董学平 一种扩增生产自然杀伤细胞的方法
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