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摘要:一种基于MoS2‑Au‑Fc纳米复合材料构建低密度脂蛋白检测的传感器,以LDL适配体为识别探针,基于二硫化钼‑金‑二茂铁甲酸MoS2‑Au‑Fc的纳米复合材料良好的电子传递效应和优异的负载能力,LDL适配体能够特异性识别和结合LDL蛋白,构建一种能对LDL蛋白进行特异性识别以及定量分析的新型适配体传感器,用以检测血清中LDL的含量。该方法操作简单、省时、费用低,最低检测限为0.001μgmL。
主权项:1.一种基于二硫化钼-金-二茂铁甲酸MoS2-Au-Fc纳米复合材料构建低密度脂蛋白检测的传感器,按以下步骤进行:步骤1:MoS2-Au-Fc纳米复合材料的制备1二硫化钼MoS2的预处理:往MoS2加入N’N二甲基甲酰胺DMF,破碎;随后加入β-巯基乙胺搅拌,离心,去上清液,得到氨基化二硫化钼MoS2-NH2;2二硫化钼-二茂铁甲酸MoS2-Fc的制备:取质量等比例的Fc粉末和MoS2-NH2混合,加入N-3-二甲基氨基丙基-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐N-羟基琥珀酰亚胺EDCNHS,搅拌,离心,去上清液,得到MoS2-Fc;3金纳米颗粒AuNPs的制备:配制氯金酸HAuCl4溶液,搅拌至沸腾,加入柠檬酸钠溶液,待溶液变色后停止加热,冷却,得到AuNPs溶液;4MoS2-Au-Fc的制备:往MoS2-Fc溶液中加入AuNPs溶液,搅拌,离心,去掉上清液,得到MoS2-Au-Fc;步骤2:电极的修饰与生物传感界面的构建1金纳米颗粒丝网印刷电极AuNPsSPCE的制备:把未活化的电极SPCE放置在稀硫酸溶液中,循环伏安扫描,得到活化电极,活化的电极片浸泡在HAuCl4溶液中,用磁力搅拌器搅拌,进行恒电位沉积;用纯水冲洗,吹干得到AuNPsSPCE;2二硫化钼-金-二茂铁甲酸金纳米颗粒丝网印刷电极MoS2-Au-FcAuNPsSPCE传感界面的制备:往所得的AuNPsSPCE滴加MoS2-Au-Fc溶液,孵育,冲洗,吹干;得到MoS2-Au-FcAuNPsSPCE;3低密度脂蛋白适配体二硫化钼-金-二茂铁甲酸金纳米颗粒丝网印刷电极LDLAptMoS2-Au-FcAuNPsSPCE电化学适配体传感器的构建:往得到的MoS2-Au-FcAuNPsSPCE界面滴加戊二醛GA溶液,孵育;将LDL适配体LDLApt溶液滴在MoS2-Au-FcAuNPsSPCE界面上,放进振荡培养箱孵育,用纯水冲洗,吹干,在传感界面滴加牛血清蛋白BSA溶液,晾干,得到LDLAptMoS2-Au-FcAuNPsSPCE电化学适配体传感器;步骤3:LDL的工作曲线绘制1将标准LDL溶液滴加到步骤2得到的LDLAptMoS2-Au-FcAuNPsSPCE传感界面,孵育,用纯水洗涤,得到工作电极,晾干备用;2将工作电极放入磷酸缓冲溶液PBS中,采用电化学工作站的差分脉冲扫描法DPV扫描,记录其峰电流;3分别对不同浓度的LDL进行检测,绘制标准曲线;步骤4:实际样品中LDL的检测1在步骤2得到的LDLAptMoS2-Au-FcAuNPsSPCE传感界面,滴加待测实际样品,孵育,用纯水洗涤,得到工作电极,晾干备用;2将工作电极放入PBS溶液中,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰电流;3根据步骤3所述标准曲线,得到所述待测实际样品中LDL的浓度。
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