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一种快速检测乙型肝炎病毒前S2抗原的磁性免疫层析试纸条及方法 

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摘要:本发明具体涉及一种可以快速定性、定量检测乙型肝炎病毒前S2抗原的磁性免疫层析试纸条及检测方法。试纸条的检测线为乙肝前S2抗原‑牛血清白蛋白偶联物,质控线为鼠IgG。首先通过预孵育处理,将样品中的乙肝前S2抗原和抗体及偶联了羊抗鼠二抗的免疫磁珠反应,避免了固定化抗体的空间位阻效应,使得抗原与抗体间的结合更加充分;然后采用磁性免疫层析试纸条检测。本发明通过将磁性纳米材料表面修饰的特异性单克隆抗体改为通用性强且易于获取的二抗,降低了检测成本,并利用二抗的信号放大效应提高了检测灵敏度;此外,本发明利用磁信号的稳定、可准确定量特点,在肉眼快速定性检测乙型肝炎病毒前S2抗原的同时,还实现了准确、灵敏的定量检测。

主权项:1.一种快速检测乙型肝炎病毒前S2抗原的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)预孵育:将一抗及免疫磁珠与待测样品充分混匀后静置1-30分钟;所述的一抗为乙型肝炎病毒前S2特异性单克隆抗体;所述的免疫磁珠是指偶联了羊抗鼠二抗的超顺磁性纳米颗粒;(2)预孵育后的溶液与层析液充分混匀5-60秒,滴加到磁性免疫层析试纸条的样品垫上;所述的层析液是含5%-20%BSA和1%-5%吐温-20的BS缓冲液;所述的磁性免疫层析试纸条包括黏性底板及其上依次粘附搭接的样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(4);所述的硝酸纤维素膜(3)上包被检测线(5)和质控线(6);所述的检测线为乙型肝炎病毒肝前S2抗原-牛血清白蛋白偶联物,所述的质控线为鼠IgG;所述的乙型肝炎病毒前S2抗原-牛血清白蛋白偶联物是将合成的乙肝前S2抗原多肽与牛血清白蛋白用双功能偶联剂4-N-马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯将BSA上的氨基和乙型肝炎病毒前S2抗原多肽上的巯基相连接的偶联物;所述的乙肝前S2抗原多肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示:SEQIDNo.1:CMQWNSTAFHQALQDPRVRGLYFPAGG;(3)定性或定量判断结果。

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