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申请/专利权人：陕西师范大学

摘要：一种马哈利樱桃砧木快速繁殖方法，采用了组培苗的制备、组培苗生根培养、长苗炼苗培养、移栽组培方法，在暗室进行组培苗的制备和组培苗生根培养，并在自然光下长苗、长根、炼苗同步进行，组培步骤采用了适合于马哈利樱桃砧木快速繁殖的芽生长培养基和增殖培养基以及生根培养基，增殖和生根效果好，使马哈利樱桃砧木生根率达85％以上，而且根系粗壮整齐，同时组培苗生长健壮，叶色浓绿，有效地节约了人力和物力，移栽成活率可达87.65％，为工厂化生产奠定了基础。本发明组培方法具有简便易行、简化了程序、提高了工效、降低了成本等优点，可用于马哈利樱桃砧木的快速繁殖。

主权项：1、一种马哈利樱桃砧木快速繁殖方法，其特征在于它包括如下步骤：1组培苗的制备原材料的预处理：剪取大田栽培的盛果期优良单株的无病虫害的健壮营养枝，切取其幼芽，流水冲洗干净，用干净滤纸吸干；在超净工作台上将冲洗干净的幼芽在70％酒精中浸泡10～30秒，无菌水冲洗3次，每次5分钟，再置入0.1％HgCl2溶液中灭菌6～8分钟，用无菌水冲洗幼芽3～5次，每次5分钟，最后用无菌滤纸吸干，作为外植体扦插入12MS基本培养基中使芽生长，每隔3～5天将芽转接入新的12MS基本培养基中，重复2～3次，待培养基不再变色时，将芽转接入芽生长培养基中，该芽生长培养基为在1升MS基本培养基中加入下述的原料及其配比制成：白砂糖15～80g琼脂粉4～10g6-苄胺基嘌呤0.2～0.5mg当芽长至1.5～3cm，有3～5片真叶时，将苗转入增殖培养基中进行快速繁殖，该增殖培养基为在1升MS基本培养基中加入下述的原料及其配比制成：白砂糖15～80g琼脂粉4～10g6-苄胺基嘌呤0.3～4mg吲哚乙酸0.3～0.9mg赤霉素0.1～3mg酪蛋白0.01～0.05g配制好的增殖培养基分装在培养瓶中，每瓶装25～35毫升，盖好瓶盖，在压力为0.1～0.15MPa下灭菌25分钟，将增殖生长的丛生芽分离成单个芽接入培养瓶中，其中生长较快的苗在转接时可切成带1～2个芽的茎段扦插于增殖培养基上，培养瓶置于光照强度为3500～4500lx、温度为20℃～30℃、湿度为70％～90％的培养室中培养，每天照射10～12小时，每一次继代培养使用新鲜配置的增殖培养基，继代培养条件与第一代培养条件相同，选取繁殖8～30代的1.5～3cm高的健壮组培苗或1.5～3cm的带顶芽的上部茎段为材料进行生根培养。2组培苗生根培养将1中切好的组培苗或茎段放入生根培养基中进行生根培养，该生根培养基为在1升12MS基本培养基中加入下述的原料及其配比制成：白砂糖15～80g琼脂粉4～10g吲哚-3-丁酸0.1～0.9mg或所用的生根培养基为在1升12MS基本培养基中加入下述的原料及其配比制成：白砂糖15～80g琼脂粉4～10g吲哚乙酸0.5～3.5mg将配制好的生根培养基分装在培养瓶中，每瓶25～35毫升，盖好瓶盖，在压力为0.1～0.15MPa下灭菌25分钟，培养瓶移入温度为18℃～22℃、湿度为70％～90％的暗室中进行暗培养，暗培养3～7天；3长苗炼苗培养将经过暗培养的培养瓶直接移入光照强度为800～8000lx、温度20～25℃、湿度为75％～90％的温室内，每天光照9～11小时，驯化20～25天，打开瓶盖加入0.5～1.0厘米高自来水炼苗5～10天，当苗高2～6厘米，根长1～2.5厘米时进行移栽。4.移栽取出3中经过炼苗的幼苗，洗净根上残留的生根培养基，用浓度为100ppm的生根粉浸泡处理幼苗根部，移入装有营养土的移栽容器中，移栽前浇足110MS基本培养基溶液，上覆盖塑料薄膜，保持湿度在70％～100％，7天后逐渐通风，15天后揭膜，在此期间喷洒110MS基本培养基溶液，继续在光照强度为800～8000lx、温度20～25℃、湿度为70％～90％的温室内，培养20～50天，在苗高5～15厘米，有8～15片叶时移栽入大田。

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