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申请/专利权人:扬州工业职业技术学院
摘要:一种玉米秸秆固液两项发酵制备厚垣孢子生物修复剂的方法。涉及生物修复剂,尤其涉及一种玉米秸秆固液两项发酵制备厚垣孢子生物修复剂的方法。提供了一种可大幅提高木霉菌厚垣孢子产量,又能缩短发酵周期,同时,大幅降低生产成本的一种玉米秸秆固液两项发酵制备厚垣孢子生物修复剂的方法。本发明在工作中,以玉米秸秆为原料,采用固液两相发酵和分段发酵工艺,提高了厚垣孢子产量,降低了生产成本和使用成本;同时,还能提高土传病害的防治效果,降低发病率,提高对农药残留的降解效果。
主权项:1.一种玉米秸秆固液两项发酵制备厚垣孢子生物修复剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、制备液体培养基:取秸秆酶解液100ml,放入250ml三角瓶,加入(NH4)2SO40.4g-0.5g,K2HPO40.1g-0.2g,CaCl20.1-0.2g,MnSO4·H2O0.3g,调节pH至5-5.1,高压灭菌20-30分钟,备用;S2、液体发酵:冷却后的液体培养基内接入已活化好的木霉菌T42-H,于26-28℃、160转分震荡培养3天,在超净工作台无菌条件下,用已灭菌的电动搅拌器,在600转分下搅拌5分钟,继续放入摇床培养1天,取样用血球计数板测厚垣孢子和分生孢子总数达到109个ml,停止液体发酵;将盛有发酵液的三角瓶,在超净工作台在600转分下搅拌5分钟,作为种子液备用;S3、制备固体培养基:已预处理的玉米秸秆粉50-51g,麸皮1-2g,草炭2-3g,蔗糖0.1-0.2g,(NH4)2SO40.2-0.3g,KH2PO40.1-0.2g,MgS04·7H200.08-0.1g,将其溶于100mL的水中,调节pH至6-6.1;取150克装入300ml三角瓶,高压灭菌30-40分钟,备用;S4、固液两项发酵:灭菌后的固体培养基冷却后接入上述种子液80-85mL,同时加入纤维素酶和厚垣孢子促进剂,搅拌均匀放在28-29℃恒温培养箱中,培养30-35小时;降低温度至25-26℃恒温避光培养67-70小时,用血球计数板测量固体发酵物的厚垣孢量达到1010g,即可结束发酵出料;常温风干或使用真空干燥器控制温度40-42℃干燥,即可得到厚垣孢子生物修复剂。
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