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一种无标记阿片受体NOP的细胞筛选模型 

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申请/专利权人:泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司

摘要:本发明提供了一种无标记阿片受体NOP的细胞筛选模型。本发明基于无标记细胞整合药理学技术,利用NOP稳定表达的细胞系,建立了筛选NOP受体的激动剂和拮抗剂的方法。此方法还可以用于研究影响NOP受体下游通路的调节剂。本发明构建的NOP细胞筛选模型不需要荧光标记且检测过程无需额外添加指示剂,具有靶点‑通路整合响应、对细胞无损伤、检测结果可靠、灵敏度高、筛选通量高及操作简便等特点。其用于从天然产物库、代谢产物库及组合化学库中寻找NOP受体的激动剂、拮抗剂和通路调节剂,及NOP受体参与的伤害感受、药物滥用副作用及心血管疾病的药物筛选。

主权项:1.一种无标记阿片受体NOP的细胞筛选模型,其特征在于,建立过程为:1)在细胞兼容的具有光学生物传感功能的384微孔板中接种HEK-293-NOP细胞,接种的细胞密度为1.0~4.5×104个孔,细胞培养液体积为40µL孔,接种后细胞培养时间为18~24h;2)将溶解在含0.1%BSA的HBSS缓冲盐中的孤啡肽激动剂以浓度为0.001~10000nM加入到接种HEK-293-NOP细胞的384微孔板中,检测其DMR特征信号谱;3)将溶解在含0.1%BSA的HBSS缓冲盐中的SB612111拮抗剂以浓度为1~20000nM加入到接种HEK-293-NOP细胞的384微孔板中,检测其DMR特征信号谱;4)获得的所有DMR特征信号谱具有浓度-响应依赖关系。

全文数据:

权利要求:

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