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利用CRISPR/Cas9敲除文库技术筛选JEV抗性基因的方法与靶点 

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申请/专利权人:华中农业大学

摘要:本发明提供了利用CRISPRCas9敲除文库技术筛选JEV抗性基因的方法与靶点。具体地,本发明提供了一种基于全基因组CRISPRCas9敲除文库策略,筛选JEV抗性相关基因的方法及候选靶基因。本发明方法先利用一个包含有针对猪全基因组的sgRNA质粒库包装慢病毒,感染Cas9稳定表达的猪体细胞,通过流式细胞术富集获得全基因组基因敲除细胞库。再利用JEV感染敲除细胞库,收集存活细胞,提取基因组DNA并进行PCR扩增,建库和高通量测序,最后利用生物信息学分析获得数十个JEV抗性候选功能基因。本发明建立了基于全基因CRISPRCas9敲除文库策略筛选猪的JEV抗病基因的方法,所鉴定的候选基因靶点可用于抑制JEV复制的靶向药物开发与抗病育种研究。

主权项:1.一种JEV抗性促进剂的用途,其特征在于,用来制备抗猪流行性乙型脑炎的化合物或药物组合物,或用于制备抗猪流行性乙型脑炎模型动物的制剂,其中,所述的JEV抗性促进剂为JEV抗性相关基因的抑制剂,并且,所述JEV抗性相关基因选自下组:SLC35B2、HS6ST1、GLCE、或其组合。

全文数据:

权利要求:

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