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摘要：本发明涉及一种LAMP氢离子驱动i‑motif变换比率型电化学传感器及构建方法，通过常规LAMP技术与电化学检测相结合，利用目标物短链DNA延伸形成的双哑铃状结构中间体进行LAMP扩增，其副产物H+诱导i‑motif构象转换实现比率型电化学信号的显著改变和放大输出，避免常规LAMP技术模板DNA及引物设计的复杂性和局限性，保障LAMP高特异性和简便快捷，同时提升检测灵敏度。两种电化学探针的信号比值能有效降低背景信号，确保高特异性和高灵敏度、良好的稳定性和再生性。本发明建立的电化学检测方法简单方便快捷；无需引入其他辅助反应物，提高定量检测的特异性和灵敏度，缩短分析时间，降低检测成本。
主权项：1.一种LAMP氢离子驱动i-motif变换比率型电化学传感器的构建方法，其特征在于，先将用不同电活性物质标记的两条DNA单链进行反应，然后将所得产物滴加至电极表面，最后在电极表面滴加LAMP反应溶液，即可完成所述传感器的构建；其中，LAMP反应溶液是通过以下方法制备得到的：利用hDNA与模板HT和前驱体HP进行扩增后，制备具有内引物结合位点的特殊双哑铃DNA结构，然后以该结构为起始模板，经LAMP扩增获得含大量副产物H+的LAMP反应溶液；所述的两条DNA单链为S1和S2，它们分别用二茂铁Fc和亚甲蓝MB标记，得Fc-S1和MB-S2，即为电化学信号探针,所述Fc-S1分别在S1的5’端和3’用巯基-SH和Fc修饰，自由状态的构象为发夹结构，Fc-S1通过Au-S键结合到电极表面；所述MB-S2在S2的3’端修饰MB，其18个碱基富含14个C碱基，能形成具有pH响应的i-motif结构，且互补于Fc-S1的茎和环的18个碱基，能打开Fc-S1并与之杂交；所述HT为根据hDNA的碱基序列设计的含一茎-环发夹结构的DNA模板，其3’端用磷酸基团PO43-修饰，靠近3’端为hDNA的互补序列；所述HP为含一茎-环发夹结构的DNA前驱体，其3’端方向的21个碱基能与HT中靠近hDNA互补序列的21个碱基杂交。
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百度查询： 西南大学 一种LAMP氢离子驱动i-motif变换比率型电化学传感器及构建方法
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