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摘要：本发明公开一种高溶解性重组人源化I型胶原蛋白及其表达方式与重组质粒，属于基因工程技术领域；本发明对人源I型胶原蛋白α1链的氨基酸进行亲水性分析，挑选高亲水性胶原蛋白基因片段h1COL1α1，并在其前引入来源于人源SIRT3蛋白的SIR2L3增强子，优化合成挑选的h1COL1α1和SIR2L3增强子片段，利用PCR克隆获取连接片段，通过GibsonAssembly无缝连接技术连接胶原蛋白片段h1COL1α1、SIR2L3增强子片段和pPIC9K载体骨架片段，构建得到重组质粒pPIC9K‑SIR2L3‑h1COL1α1；所述重组质粒经巴斯德毕赤酵母细胞GS115可表达高溶解性人源化I型胶原蛋白。
主权项：1.一种表达高溶解性重组人源化I型胶原蛋白的重组质粒的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、对人源I型胶原蛋白α1链的氨基酸进行亲水性分析，挑选高亲水性的重组胶原蛋白片段h1COL1α1，在重组胶原蛋白片段h1COL1α1前引入来源于人源的SIRT3蛋白的SIR2L3增强子，根据毕赤酵母的密码子偏好性优化合成挑选的h1COL1α1和SIR2L3增强子片段；S2、利用PCR克隆获取连接片段，通过GibsonAssembly无缝连接技术连接胶原蛋白片段h1COL1α1、SIR2L3增强子片段和pPIC9K载体骨架片段，构建得到所述重组质粒pPIC9K-SIR2L3-h1COL1α1。
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百度查询： 广东筑美生物医疗科技有限公司 一种高溶解性重组人源化I型胶原蛋白及其表达方式与重组质粒
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