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全身性过表达人源α-Syn-NLS转基因鼠的构建方法 

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申请/专利权人:中国医学科学院医学生物学研究所

摘要:本发明公开一种全身性过表达人源α‑Syn‑NLS转基因鼠的构建方法,本发明方法首先通过PCR方法获取人源α‑Syn编码序列和SV40核易位信号序列,再通过BP反应构建含有目的序列的入门克隆载体,酶切后,通过LR反应将入门克隆载体构建成含有目的序列的重组表达载体,再酶切后,以慢病毒LV过表达载体pLV‑EGFP:T2A:Puro‑EF1A为骨架载体,将含有目的序列的重组表达载体pDown‑hSNCASV40NLS构建入慢病毒载体中,进行病毒包装纯化得到过表达核输入α‑Syn的pLV病毒,采用受精卵原核注射方法注射该病毒,获得全身过表达核输入人源α‑Syn蛋白的转基因鼠,能长期稳定的过表达α‑Syn,并同时解决核输入的问题,该模型对研究α‑Syn核输入的全面功能和机制具有重要的价值。

主权项:1.一种全身性过表达人源α-SYn-NLS转基因鼠的构建方法,其特征在于:构建含人源α-Syn序列和SV40核易位信号序列的重组表达载体pDown-hSNCASV40NLS,然后将重组表达载体pDown-hSNCASV40NLS构建入慢病毒载体中,病毒包装纯化得到慢病毒人源α-Syn-NLS过表达载体,将慢病毒人源α-Syn-NLS过表达载体注射到小鼠受精卵中,获得了全身性过表达人源性α-Syn-NLS的转基因小鼠。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国医学科学院医学生物学研究所 全身性过表达人源α-Syn-NLS转基因鼠的构建方法

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