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一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法 

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申请/专利权人:浙江大学

摘要:本发明公开了一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法,属于数字化核酸培养技术领域。所述方法包括:1往待测样品环介导等温扩增反应体系中加入水凝胶单体丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺,引发交联形成水凝胶体系;2等温扩增反应;3扩增结束后,对水凝胶体系中形成的焦磷酸镁沉淀点进行识别计数,计算得出待测样品中的目标核酸分子的浓度。本发明将聚丙烯酰胺水凝胶和数字LAMP结合起来,利用PAM的吸附絮凝能力将LAMP反应副产物焦磷酸镁沉淀控制在核酸扩增团附近,形成与背景有明显颜色差别的白点,而且位置和大小跟核酸扩增团基本一致,实现了无染料肉眼可识别的核酸培养计数效果。

主权项:1.一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法,其特征在于,包括以下步骤:1将待测样品加入到环介导等温扩增反应体系溶液中,再往反应体系中加入水凝胶单体,引发交联形成水凝胶体系;所述水凝胶单体包括丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺,所述环介导等温扩增反应体系包括特异性扩增目标核酸分子的引物;2将水凝胶体系置于等温条件下加热进行环介导等温扩增反应;3扩增结束后,对水凝胶体系中形成的焦磷酸镁沉淀点进行识别计数,计算得出待测样品中的目标核酸分子的浓度。

全文数据:

权利要求:

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