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用于纯化核酸探针的纯化膜、纯化柱、纯化试剂盒和纯化方法专利

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申请/专利权人:益善生物技术股份有限公司

申请日:2020-12-15

公开(公告)日:2023-07-21

公开(公告)号:CN112553192B

专利技术分类:..分离、制备或纯化DNA或RNA的方法(DNA或RNA的化学制备入C07H21/00;自微生物中或用酶制备非结构多核苷酸入C12P19/34)[2006.01]

专利摘要:本发明公开了用于纯化核酸探针的纯化膜、纯化柱、纯化试剂盒和纯化方法,涉及分子生物与生物化学技术领域。本发明公开的纯化膜包括过滤膜和结合在过滤膜上用于去除核酸探针中的非特异性重复序列的锚定成分,本发明提供的纯化膜可在针对核酸探针纯化的同时消除核酸探针中的非特异性重复序列,降低非特异性背景信号的核酸探针,并有效提高核酸探针的纯度。

专利权项:1.一种纯化试剂盒在FISH探针纯化中的应用,其特征在于,所述纯化试剂盒包括纯化柱和纯化试剂;所述纯化柱包括柱体和装载于所述柱体中的纯化膜;所述纯化膜包括过滤膜和结合在所述过滤膜上用于去除核酸探针中的非特异性重复序列的锚定成分;所述锚定成分为人类cot-1DNA;所述过滤膜为玻璃纤维素膜或变性硅胶膜;所述纯化膜的制备方法包括利用印迹转移的方式将所述锚定成分转移至所述过滤膜上,再对转移的锚定成分进行紫外线照射使其固定结合在所述过滤膜上;进行所述紫外线照射的时间为6min;进行所述紫外线照射的波长为260nm;所述纯化试剂包括如下溶液中的至少一种:洗涤液1、洗涤液2以及洗脱液;其中,所述洗涤液1包括:48%vv甲酰胺、0.12M盐酸胍、0.33M醋酸钠、4%vvTritonX-100、6%wt硫氰酸钠、12mM三羟甲基氨基甲烷-盐酸、以及1%vv月桂酰肌氨酸钠;所述洗涤液2包括:70%vv乙醇、0.12M柠檬酸钠、0.4%wtN-烷酰肌氨酸、0.2%vvNP-40、以及7mM乙二胺四乙酸;所述洗脱液为10mMTris-HCl。

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