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申请/专利权人：中山大学附属第七医院(深圳)
摘要：本发明提供了一种新型且高效经济的eccDNA合成方法及其在microRNA过表达中的应用，属于基于生物DNA序列的基因合成领域。本发明通过提取样本总DNA，纯化得到内源性eccDNA；内源性eccDNA与随机引物混合，进行变性退火，退火产物进行RCA反应；以RCA反应产物为模板，扩增获得两条半互补的目标线性片段A和线性片段B；将线性片段A和线性片段B混合，在含有TaqDNA连接酶的反应体系中，进行变性退火和连接反应，获得目标eccDNA。本发明所述方法节省了DNA合成费用，缩短了时间周期，可高保真地获得内源性eccDNA，更好地模拟内源性eccDNA的功能。
主权项：1.一种eccDNA合成方法，其特征在于，包括以下步骤：1提取样本总DNA，纯化得到内源性eccDNA；2内源性eccDNA与随机引物混合，进行变性退火，退火产物进行RCA反应；3以RCA反应产物为模板，扩增获得两条半互补的目标线性片段A和线性片段B；4将线性片段A和线性片段B混合，在含有TaqDNA连接酶的反应体系中，进行变性退火和连接反应，获得目标eccDNA。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中山大学附属第七医院(深圳) 一种新型且高效经济的eccDNA合成方法及其在microRNA过表达中的应用
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