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申请/专利权人：吉林省养蜂科学研究所(吉林省蜂产品质量管理监督站、吉林省蜜蜂遗传资源基因保护中心)

摘要：本发明公开了保种蜜蜂ApismelliferaSTRs基因频率的检测方法。本发明保护的蜜蜂STRs分型检测方法，包括如下步骤:取质量小于等于10mg的蜜蜂样本、使用微量组织裂解液裂解所述样本提取样本DNA，利用引物并使用三个溶液配置而成的PCR体系扩增提取的样本DNA的STRs位点得到PCR产物,使从所述PCR产物中分离PCR扩增子和对分离的PCR扩增子进行STRs分型的步骤。通过使用本发明所提供的方法可以在蜜蜂STRs分型统计过程中获得可靠的基因型计数，进而准确计算保种蜜蜂STRs基因频率，为准确判断保种蜜蜂的群体遗传结构，动态监测和或追踪种畜的保存效果提供可靠的信息。

主权项：1.蜜蜂STRs分型检测方法，包括如下步骤：A1）制备样本DNA：取质量小于等于10mg的蜜蜂器官和或组织作为样本，用组织裂解液裂解所述样本，提取DNA，得到样本DNA；所述组织裂解液由溶质和溶剂组成，所述溶质为三羟甲基氨基甲烷盐酸、乙二胺四乙酸二钠、氯化钠和十二烷基硫酸钠；所述溶质中三羟甲基氨基甲烷盐酸、乙二胺四乙酸二钠、氯化钠和十二烷基硫酸钠的质量比为3.36:78.59:1.46:0.1；A2）利用引物进行PCR扩增所述样本DNA的STRs位点，得到PCR产物；所述PCR扩增中采用的PCR体系由三个溶液配制而成；所述三个溶液的名称分别为Mix-1、Mix-2和Mix-3；所述Mix-1是溶质为正向PCR引物和反向PCR引物的溶液，所述Mix-2是溶质为dNTP、MgCl2和Tris-HCl缓冲液的溶液，所述Mix-3是溶质为DNA聚合酶和所述样本DNA的溶液；所述正向引物为5’ATCAAAGACATCGGAGAACAAAGC；所述反向引物为5’CCGCTCTAATTTCCCTAGATCTATCC；A3）从所述PCR产物中分离PCR扩增子；所述从PCR产物中分离PCR扩增子是通过PCR产物背景影响消减和微流体胶毛细管电泳方法实现的；所述PCR产物背景影响消减是通过批量稀释PCR产物实现的；A4）对分离的PCR扩增子进行STRs分型；所述蜜蜂为意大利蜂、卡尼鄂拉蜂和或高加索蜂。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 吉林省养蜂科学研究所(吉林省蜂产品质量管理监督站、吉林省蜜蜂遗传资源基因保护中心) 保种蜜蜂（Apis mellifera）STRs基因频率的检测方法