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申请/专利权人：天津力牧生物科技有限公司
摘要：本发明涉及瞬时表达方式制备重组牛FSH的方法。具体地说，本发明提供了牛FSH的核苷酸序列，其包含一个基因，该基因可以编码与含有α亚单位和β亚单位的天然牛FSH相同的蛋白序列，经过串联表达和融合表达设计及密码子优化，可显著提高其表达水平。本发明所述重组表达载体为pcDNA3.4，为瞬时表达使用载体。瞬时表达所用细胞株为CHOK1‑Hi，其最高密度可达到2*107个ml。采用电转化的方式将带有目标基因的表达载体转入目标细胞株中，无血清培养重组高蛋白表达。纯化后的蛋白可用于同期发情、超数排卵、牛胚胎移植等领域。
主权项：1.制备牛FSH的方法，包含以下步骤：提供牛FSH核苷酸序列，确认α亚基和β亚基的基因序列，并进行密码子优化设计；将该核苷酸序列设计成串联表达和融合表达两种方式，进行合成；从插入重组质粒的甘油菌中提取质粒，使用电转仪将提取的质粒转入CHOK1-Hi细胞株中；对CHOK1-Hi细胞株进行大规模培养，获得包含牛促卵泡激素蛋白的培养上清。
全文数据：
权利要求：
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