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申请/专利权人：珠海舒桐医疗科技有限公司
摘要：本发明公开了一种DSB‑PE基因编辑系统及其应用。DSB‑PE基因编辑系统包括融合蛋白和pegRNA；pegRNA依次由spacer、scaffold尾端碱基、靶点序列以及PBS组成，靶点序列与scaffold尾端碱基及其互补配对碱基之间不包括逆转录模板；融合蛋白为野生型Cas9切刻酶与逆转录酶RT融合所形成。本发明的DSB‑PE系统保留了PE2系统编辑形式多样的优点，同时编辑效率高、应用范围更广泛，并且在不影响切割效率的情况下大大提升目标碱基准确插入比率，提高DSB‑PE系统的生物安全性。本系统更适用于不需要维持插入序列3'端无缝连接的编辑应用场景，可通过高效插入终止密码子实现靶基因敲除。
主权项：1.DSB-PE基因编辑系统，其特征在于，包括融合蛋白和pegRNA；所述pegRNA依次由spacer、scaffold尾端碱基、靶点序列以及PBS组成，靶点序列与scaffold尾端碱基及其互补配对碱基之间不包括逆转录模板；所述融合蛋白为野生型Cas9切刻酶与逆转录酶RT融合所形成；pegRNA的序列为5’-ggcccagactgagcacgtgagttttagagctagaaatagcaagttaaaataaggctagtccgttatcaacttgaaaaagtgABaccgagtcggtCDGCGTGCTCAGTCTG-3’；其中，CD序列为目标插入序列末尾两个碱基的反向互补序列，A序列为D序列的互补配对序列，B序列为C序列的互补配对序列；所述野生型Cas9切刻酶为氨基酸序列为SEQIDNO.2所示的蛋白质；所述逆转录酶RT为D1：D1.氨基酸序列为SEQIDNO.4所示的蛋白质。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 珠海舒桐医疗科技有限公司 DSB-PE基因编辑系统及其应用
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