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具有宽松PAM要求的双链DNA的编辑 

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申请/专利权人:武汉大学

摘要:本公开提供了新的Cas蛋白,这些新的Cas蛋白能够进行具有宽松PAM要求的基因编辑,或者当靶向负超螺旋双链DNA时甚至不需要PAM。进一步发现,负超螺旋双链DNA通常降低或者甚至消除所有Cas蛋白的PAM要求。因此,本公开提供了用于进行具有宽松PAM要求或没有PAM要求的基因编辑的组合物和方法,该基因编辑包括碱基编辑和引导编辑。

主权项:1.一种用于编辑靶核酸的方法,所述方法包括使所述靶核酸与CRISPR-Cas系统接触,所述CRISPR-Cas系统包含:来源于脂环酸芽孢杆菌属Alicyclobacillussp.的Cas9蛋白或其功能变体,其中所述功能变体与来源于脂环酸芽孢杆菌属的所述Cas9蛋白具有至少70%序列同一性;和向导RNA,所述向导RNA包含与所述靶核酸中的靶序列杂交的指导序列,其中所述靶序列a与包含CNNN和RNNA的原型间隔区相邻基序PAM相邻,其中R是A或G,并且每个N独立地是A、T、C或G,或者b具有欠旋拓扑结构。

全文数据:

权利要求:

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