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申请/专利权人：广东石油化工学院

摘要：一种基于二维碳化钛‑羧甲基壳聚糖‑氯化血红素纳米复合材料MXene‑CMCS‑Hemin构建检测LDL的电化学适配体传感器，以具有大比表面积，高电导率和良好原位电化学活性的MXene‑CMCS‑Hemin纳米复合材料为载体，与LDLApt偶联形成信号探针，LDL蛋白与LDLApt特异性结合，形成复合物，通过DPV法记录MXene‑CMCS‑Hemin中Hemin的氧化还原峰值电流变化，从而实现对LDL的检测，且最低检测限为0.095μmolL。该方法成本低、选择性好。

主权项：1.一种基于二维碳化钛-羧甲基壳聚糖-氯化血红素纳米复合材料MXene-CMCS-Hemin构建检测低密度脂蛋白LDL的电化学传感器，按以下步骤进行：步骤一：MXene-CMCS-Hemin的制备1功能氨基化碳化钛MXene的制备：称量20mgMXene粉末，加入10mL乙醇，用超声破碎仪进行破碎，加入0.4mL的3-氨丙基三乙氧基硅烷APTES，搅拌之后转移到离心管中高速离心，离心之后用50％的乙醇洗涤，除去未反应的APTES；将洗涤好的MXene按1mgmL的浓度分散于超纯水中，得到功能氨基化MXene；2氯化血红素Hemin的制备称量20mg氯化血红素粉末，滴加10mL氨水，并搅拌8～12h，得到Hemin溶液；3羧甲基壳聚糖CMCS的制备称量20mgCMCS，溶解于20mL的1％冰醋酸溶液，得到CMCS溶液；4MXene-CMCS的制备取制备好的MXene分散液，倒入制备好的CMCS溶液中，搅拌器搅拌6～10h，得到MXene-CMCS溶液；5MXene-CMCS-Hemin的制备将制备好的MXene-CMCS溶液按1：1比例加入N-羟基丁二酰亚胺1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺NHSEDC进行活化，然后倒入制备好的氯化血红素溶液，放到搅拌器搅拌，则得到MXene-CMCS-Hemin溶液；步骤二：电极的修饰与生物传感界面的构建1纳米金丝网印刷电极AuNPsSPE的制备：裸电极SPCE置于稀硫酸H2SO4中活化，活化后的SPE置于0.01％氯金酸HAuCl4溶液中进行电沉积，沉积电位为0.5V，沉积时间为180s，得AuNPsSPCE；2滴加2.5μL的MXene-CMCS-Hemin，干燥，用纯水清洗，干燥，得到MXene-CMCS-HeminAuNPsSPE；3将2.5μL的LDLApt溶液滴加到MXene-CMCS-HeminAuNPsSPE上，25℃孵育，洗涤未能结合的LDLApt；滴加2.5μL的0.5％牛血清白蛋白BSA封闭非活性位点，干燥，得到LDLAptMXene-CMCS-HeminAuNPsSPCE传感界面；步骤三:LDL工作曲线绘制1将标准LDL溶液滴加到步骤二得到的电化学适配体传感器中，孵育、清洗、干燥，得到LDLLDLAptMXene-CMCS-HeminAuNPsSPCE工作电极；2将工作电极放入磷酸缓冲盐溶液PBS中，采用电化学工作站的差分脉冲伏安法DPV扫描，记录其峰电流；3分别对不同浓度的LDL进行检测，记录峰值电流；根据传感器的电流响应值与LDL浓度的关系，绘制工作曲线，计算出该方法的最低检测限；步骤四：实际血清样品中LDL的检测1将待测实际血清样品加入步骤二得到的生物传感界面中，孵育，清洗，干燥；使用差分伏安脉冲法进行测量，记录传感器的电流峰值；2根据步骤三所得的标准曲线，计算出实际血清样本中LDL的浓度。

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