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申请/专利权人：北京航空航天大学
摘要：本发明属于细胞体外迁移测定技术领域，具体涉及一种用于Transwell膜上迁移细胞计数和行为评估的方法。本发明方法先将生长活性良好的细胞接种于Transwell膜上室，然后对膜上下表面的细胞分别进行染色，再将Transwell膜置于激光扫描共聚焦显微镜下拍照和扫描，最后将用激光扫描共聚焦显微镜拍摄的图片进行三维重建，建立三维坐标，基于所述三维坐标建立至少2个移动截面，包括横向截面和纵向截面，通过移动横向截面来判断Transwell膜的上下表面位置；通过移动纵向截面来判断细胞在Transwell膜上的迁移位置和状态，并计算细胞迁移率。
主权项：1.一种用于Transwell膜上迁移细胞计数和行为评估的方法，其特征自在于，包括以下步骤：S01：培养细胞并制备成细胞悬液；S02：将生长活性良好的细胞接种于Transwell膜上室，在下室的细胞培养基中加入趋化因子孵育；S03：孵育完成后固定细胞；S04：对Transwell膜上下表面的细胞进行染色，其中对Transwell膜上表面的细胞进行细胞骨架和细胞核染色，对Transwell膜下表面的细胞进行细胞核染色；S05：将Transwell膜置于激光扫描共聚焦显微镜下拍照和扫描，每组均在Transwell膜的中心位置及周围四个不同区域进行拍摄以确定Transwell膜上的滞留细胞数；S06：将用激光扫描共聚焦显微镜拍摄的图片进行三维重建，建立包括X轴、Y轴和Z轴的三维坐标，基于所述三维坐标建立至少2个移动截面，包括横向截面和纵向截面，通过移动横向截面来判断Transwell膜的上下表面位置；通过移动纵向截面来判断细胞在Transwell膜上的迁移位置和状态，并计算细胞迁移率。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京航空航天大学 一种用于Transwell膜上迁移细胞计数和行为评估的方法
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