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申请/专利权人:内蒙古农业大学;内蒙古自治区农牧业科学院;内蒙古大学;内蒙古犇牛科技有限公司
摘要:本发明提供了基于绵羊全基因组CRISPR‑Cas9敲除文库筛选绵羊卵泡颗粒细胞FSH应答基因,属于基因生物工程技术领域。本发明针对绵羊全基因组编码基因设计sgRNA探针,并构建绵羊全基因组CRISPR‑Cas9sgRNA文库,重点将绵羊2号、3号和X染色体编码基因的CRISPR‑Cas9sgRNA文库敲除绵羊卵泡颗粒细胞,构建了3条染色体的特异性敲除细胞库,基于该细胞敲除库可筛选出与FSH作用相关基因,并结合转录组测序进一步探究出FSH促进颗粒细胞增殖的剂量依赖性基因。
主权项:1.一种绵羊FSH应答基因敲除筛选文库,其特征在于,包括靶向FSH剂量依赖性基因的sgRNA表达质粒,所述靶向FSH剂量依赖性基因包括ZNF367基因、CLK1基因、PRUNE2基因、TMEM37基因、ACTG2基因、MB基因、ADIPOR2基因、HK2基因、VDR基因、AGPAT2基因、EPS8基因、FOXO4基因、TSC22D3基因;靶向所述ZNF367基因、CLK1基因、PRUNE2基因、TMEM37基因、ACTG2基因、MB基因、ADIPOR2基因、HK2基因、VDR基因、AGPAT2基因、EPS8基因、FOXO4基因、TSC22D3基因的sgRNA序列依次如SEQIDNO.1-52所示,其中每个基因对应4条sgRNA序列。
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百度查询: 内蒙古农业大学 内蒙古自治区农牧业科学院 内蒙古大学 内蒙古犇牛科技有限公司 基于绵羊全基因组CRISPR-Cas9敲除文库筛选绵羊卵泡颗粒细胞FSH应答基因
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