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申请/专利权人：南京汉欣医药科技有限公司
摘要：本发明涉及一种硫酸鱼精蛋白肽图检测方法，包括如下步骤：S1：分别将硫酸鱼精蛋白原料药、参比制剂和或标准品通过酶解得到特征肽段；S2：将上述不同来源的特征肽段分别进行高效液相色谱串联质谱检测，对比特征肽段峰的保留时间、峰面积百分比及分子量，评估硫酸鱼精蛋白待测样品的质量；所述高效液相色谱使用亲水作用色谱柱InertsilAmide，流动相A为乙酸铵或甲酸铵的水溶液，流动相B为含有酸性缓冲液的乙腈溶液。本发明可以快速评估硫酸鱼精蛋白待测样品的质量，对完善该品种的质量控制具有指导意义，也为深入了解该品种的物质基础提供参考。
主权项：1.一种硫酸鱼精蛋白肽图检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：分别将硫酸鱼精蛋白原料药与参比制剂和或标准品通过酶解得到特征肽段；S2：将上述不同来源的特征肽段分别进行高效液相色谱串联质谱检测，对比特征肽段峰的保留时间、峰面积百分比及分子量，评估硫酸鱼精蛋白待测样品的质量；所述S1步骤中使用的酶可以特异性切割精氨酸；所述S1步骤中使用的酶选自胰蛋白酶、内肽酶Arg-C或羧肽酶B；所述S1步骤中所述特征肽段由15个肽段组成，所述肽段分别由1～4个氨基酸组成，所述特征肽段为PIR、IR、PVR、R、PR、VSR、ASR、GGR、SSR、RPVR、SSSR、RPR、RR、RGGR、RRPR；所述S2步骤中所述高效液相色谱使用亲水作用色谱柱InertsilAmide，流动相A为乙酸铵或甲酸铵的水溶液，流动相B为含有甲酸或乙酸的乙腈溶液；流动相A的质量浓度为1～500mM，流动相B中甲酸或乙酸的添加量为0.01％～1％；洗脱梯度为0～40min，流动相B的体积占比由75％降低至65％；流动相流速为1.0mlmin；柱温为40℃；波长为UV210nm；所述质谱的条件为：ESI离子源，正离子模式；质荷比范围：100～1000MZ。
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权利要求：
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