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申请/专利权人:中国林业科学研究院林产化学工业研究所
摘要:本发明公开了一种利用固定化酶从马蓝叶中制备生物碱和黄酮化合物的方法,属于植物活性物制备技术领域,该方法用马蓝鲜叶或干叶为原料,经过90℃以上的热水提取,经固定化酶转化,然后离心、洗涤和干燥等工艺制备得到的粉末。本发明实现了将马蓝叶中吲哚β‑D‑葡萄糖苷完全转化,相比传统方法,缩短了生产工艺,提高了生产效率。具有条件温和、过程环保和固定化酶可重复利用的特点,适宜于工业化生产。
主权项:1.一种利用固定化酶从马蓝叶中制备生物碱和黄酮化合物的方法,所述方法的步骤在于:(1)马蓝鲜叶(或干叶),采用90℃以上的水,浸泡提取,马蓝鲜叶(或干叶)与水的比例按gmL为1:10~1:60,时间为10~60min,浸泡1~3次,过滤,除去叶渣,得到提取液,提取液中吲哚苷的含量为0.1~1.0mgmL;(2)将固定化酶溶解在缓冲溶液中10~30min,得到固定化酶溶液;用缓冲溶液调节上述提取液的pH值,pH值为5.0~6.5;将固定化酶溶液加入到调节好pH值的提取液中,控制酶活力为1~5UmL,使其在温度为30~60℃,搅拌速度为20~80转分钟,时间为16~48h的条件下反应;(3)反应结束后,磁性分离固定化酶颗粒,倒出全部反应液,用蒸馏水清洗固定化酶颗粒2~4次,回收固定化酶,测定回收固定化酶的酶活力;将清洗液与反应液合并,合并后的液体离心得到沉淀Ⅰ,离心的转速为6000~10000转分钟,时间3~10分钟;(4)将上述沉淀Ⅰ,用蒸馏水浸泡,沉淀Ⅰ与蒸馏水的比例按gmL为1:20~1:100,离心,除去水得沉淀Ⅱ,重复2~3次,将沉淀Ⅱ干燥后即为生物碱和黄酮化合物,计算化合物得率,并采用高效液相色谱分析方法测定生物碱和黄酮化合物含量。
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