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一种慢病毒载体介导生产BLOC1S1转基因山羊方法 

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摘要:本发明属于转基因山羊制备技术领域,公开了一种慢病毒载体介导生产表达BLOC1S1转基因山羊方法,其特征在于:(1)构建含有BLOC1S1基因的慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞后超速离心,PBS重悬后获得慢病毒浓缩液;(2)对山羊超数排卵后配种,于最后一次配种后12h冲胚获得受精卵,利用显微操作系统将慢病毒浓缩液注射于受精卵透明带下,胚胎培养液继续培养24h待发育至2细胞进行输卵管移植;(3)利用设计的跨载体引物PCR和qPCR技术检测转基因效率检测鉴定。采用本发明的方法,成功获得过表达BLOC1S1转基因山羊,转基因效率为63.6%。

主权项:1.一种慢病毒载体介导生产表达BLOC1S1转基因山羊方法,其特征在于:将含有BLOC1S1基因的慢病毒载体与包装质粒PAX2和VSVG按照4:3:2的比例共转染293T细胞,分别于48h和72h后收集病毒并超速离心,使用50μLPBS重悬后获得慢病毒浓缩液,病毒滴度达1×107IU以上,每管10μL分装后-80℃冷冻保存。

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