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申请/专利权人:华宇生物科技(腾冲)有限公司
摘要:本发明设计公开了一种定量PRRS病毒颗粒的方法及其应用,包括如下步骤:首先将按倍数稀释的牛血清白蛋白标准品用0.22μm的滤膜过滤,取滤液600μl加入高效液相色谱仪配套检测瓶中,检测流速为0.5mlmin;采用紫外和激光检测器连续检测溶液的光学信号,通过计算机软件系统分析样品的出峰面积,得到标准品吸收峰面积与浓度之间的标准曲线;按上述方法进行PRRS病毒颗粒样品的检测,根据标准品蛋白浓度和紫外吸收峰面积的回归方程计算PRRS病毒颗粒的含量。本发明具有较好的重复性和稳定性,操作简单,检测结果准确可靠、效率高,适用于PRRS病毒颗粒抗原含量的测定,在PRRS疫苗抗原生产和质量评估等方面具有重要的指导意义。
主权项:1.一种定量PRRS病毒颗粒的方法,其特征在于:具体包括以下步骤:S1:制备牛血清白蛋白标准品工作液,所述的标准品工作液采用pH8.0的TN缓冲液梯度稀释,其系列浓度分别为0µgml、10µgml、20µgml、40µgml、80µgml、160µgml,再使用0.22μm的滤膜分别过滤;S2:准备待测样品溶液,取PRRSV病毒颗粒样品,用0.22μm的滤膜过滤;S3:将步骤S1所得的标准品工作溶液加入配套检测瓶中,依次通过高效液相色谱仪检测,绘制标准品工作溶液的吸收峰面积与蛋白浓度之间的标准曲线,得出线性回归方程;S4:将步骤S2所得的待测样品溶液加入配套检测瓶中,依次通过高效液相色谱仪检测,对色谱峰积分得到所述待测样品的吸收峰面积,以保留时间定性,根据步骤S3中所得的回归方程定量,由此计算出待测样品中PRRS病毒颗粒的含量。
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权利要求:
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