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一种人胎盘绒毛外泌体快速提取试剂盒、提取方法、胎盘外泌体及应用 

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申请/专利权人:优智嘉(天津)生物科技有限公司

摘要:本发明属于生物技术领域,具体涉及一种人胎盘绒毛外泌体快速提取试剂盒、提取方法、胎盘外泌体及应用。所述人胎盘绒毛外泌体快速提取试剂盒包括如下原料:混合酶、第一清洗缓冲液和第二清洗缓冲液;其中:所述混合酶包括IV胶原蛋白水解酶、中性蛋白酶、脱氧核糖核酸酶I;所述第一清洗缓冲液为磷酸盐缓冲液;所述第二清洗缓冲液为复方氯化钠溶液。本发明提供了一种能够快速提取胎盘绒毛组织中外泌体的技术流程,通过使用混合酶高效解离胎盘绒毛组织,获得外泌体的主要来源细胞,使用梯度离心法从中获取外泌体,检测外泌体浓度、纯度。结果表明:提高了胎盘绒毛组织外泌体的纯度和浓度。

主权项:1.一种人胎盘绒毛外泌体快速提取试剂盒,其特征在于,包括如下原料:混合酶、第一清洗缓冲液和第二清洗缓冲液;其中:所述混合酶由IV胶原蛋白水解酶、中性蛋白酶、脱氧核糖核酸酶I组成;所述IV胶原蛋白水解酶的浓度为1~3mgmL、所述中性蛋白酶的浓度为2.3~2.5UmL、所述脱氧核糖核酸酶I的浓度为24~26μgmL;所述第一清洗缓冲液为磷酸盐缓冲液;所述磷酸盐缓冲液中,NaCl的浓度为7.8~8.0mgmL、KCl的浓度为0.1~0.3mgmL、Na2HPO4的浓度为1.4~1.5mgmL、KH2PO4的浓度为1.7~1.9mgmL;所述第二清洗缓冲液为复方氯化钠溶液;所述复方氯化钠溶液中,NaCl的浓度为5~7mgmL、KCl的浓度为0.2~0.4mgmL、CaCl2的浓度为0.1~0.3mgmL、C3H3NaO3的浓度为3~3.2mgmL。

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